胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分,但在皮肤、肌腱、骨骼中分布*为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型,I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体,在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构,被普遍用于多种细胞的培养基质,如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外,I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织态的发生等方面也具有重要应用。注意事项:1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2) 整个操作请于冰上进行,因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。3) 整个操作请在无菌环境下无菌操作,避免污染以影响细胞生长。布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录。唐山鼠尾胶原哪家好
胶原蛋白分离提纯实验方案:提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行 酶解, 持续一段时间待混合物变成无色、 透明、 粘稠液体后即可在 4℃, 5000g 的离心力下离心 20min, 收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。 2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中,持续搅拌直至白色絮状沉淀 从溶液中析出,继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止,4℃,5000g 的离心力下离心 20min 后获得白色沉淀。 沉淀物加入一定浓度的醋酸 溶液中溶解。 3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理,重复步骤 2 的过程 2~4 次。 _x000c_鼠尾胶原蛋白经 SDS- PAGE 蛋白质电泳。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。上海正规鼠尾胶原哪家好将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用。
鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法。各个材料及其重量配比为鼠尾胶原蛋白∶聚乙烯醇∶壳聚糖为余量为水,采用冷冻干燥工艺制备。本发明所制备的止血材料主要采用鼠尾胶原蛋白制备,较传统的止血材料不可吸收、容易引起机体过敏、止血效果差等缺点,本发明所制备的止血材料具有人体内可吸收,生物相容性好;止血效果快,具有很强的亲水性;同时可启动血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,就可形成血栓,进而促使血浆结块阻止血流。同时,胶原表面的特定区域可以与细胞表面存在的类似纤连蛋白的糖蛋白结合,可以起到防止肠粘连的功效。
胶原蛋白的功效与作用:可以预防心血管病。研究表明,胶原蛋白可以降低血甘油三酯和胆固醇,并可增高体内某些缺乏的必需微量元素,从而使其维持在一个相对正常的范围之内,是一种理想的降血脂食品。此外,胶原蛋白在协助机体排出铝质,减少铝质在体内聚集方面也有独特之处。铝对人体有害,研究表明,日前逐渐增多的老年痴呆症与铝的摄入量有关,同时胶原蛋白有加速血红蛋白和红细胞生成的功效,它具有改善循环、对、缺血性脑病有利。在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。
鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到 的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的 材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞 悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下 皮肤后.以 消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液. 用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平 皿.(3)鼠尾胶原 凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴 入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中 30rain,散尽剩余氨气。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿。天津鼠尾胶原厂家
鼠尾胶原醋酸溶解:建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。唐山鼠尾胶原哪家好
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬 片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通 过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于 培养瓶内。 实验设备及材料: 大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理 盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容: 1、制备鼠尾胶原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。唐山鼠尾胶原哪家好
胶原蛋白的提取方法:酶法提取:酶法提取是利用蛋白酶使胶原溶解,水解条件温和,反应速率快,提取的胶原蛋白仍有完整的三股螺旋结构,蛋白纯度高,理化性质稳定,且无环境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶、胰蛋白酶或者复合酶。工艺可选择一步法,即利用酶液直接提取;二步法,即先用酸或者碱进行初步提取,然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO预处理革屑,然后用碱性蛋白酶提取胶原的水解产物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶,再用碱性蛋白酶提取了2种不同的胶原水解产物。赵苍碧等[2]采用胃蛋白酶和无花果蛋白酶消化法从牛腱中提取胶原蛋白,探讨了酶和酶的加入量对提取结果的影响,给出了酶对胶原...