宁波RNA提取试剂厂家

众所周知，RNA提取是一项困难的工作。常见的挑战包括RNA降解、低产率和/或纯度以及DNA污染。此外，不同的样品类型有自己独特的特性，需要特别注意。例如，微生物(如革兰氏阳性/阴性细菌、菌类、古生菌等)的细胞壁坚硬，不易被化学和酶解。其他样本类型，如粪便和植物含有压制剂(如多酚类、腐殖酸/黄腐酸、单宁酸等)，可与RNA共沉淀，并可压制下游分析，如RT-qPCR。RNA是不稳定的，极易降解。许多样品含有高水平的RNase，会快速降解RNA。为了使之较小化，较好在采集时稳定样本中的RNA。常用的样品稳定方法包括液氮快速冷冻、干冰乙醇浴或-80°C冷冻室。然而，这些方法也有缺点，如核酸的冻融损伤，并不是所有的研究人员在采集样品时都能立即使用这些方法。RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。宁波RNA提取试剂厂家

石蜡包埋组织RNA快速提取试剂盒（离心柱型）：原理简介：改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA（RNA）从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点：1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的MRL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。4、多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。长沙RNA提取试剂哪里买β-巯基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。

RNA提取浓度不高或质量不佳原因及解决办法：1、RNA降解：可能是提取样本本身降解，或者是在提取过程中导致的降级；应当尽可能使用新鲜样本进行RNA提取，采集的样本应当及时置于液氮或者-80℃冰箱冻存，并减少反复冻融。在RNA提取过程中应当使用RNase/DNasefree的吸头、离心管及其他材料，提取过程尽可能的快，提取后的RNA应置于冰盒上并及时放于-80冻存。如提取后的RNA需要进行凝胶电泳检测，则应提取好后立刻进行电泳，电泳缓冲液应更换新配制的。2、盐及有机溶剂残留：提取试剂中含有酚及胍盐，洗涤液中含有乙醇，在提取过程中裂解液吸弃不彻底，洗液没有充分晾干导致的，残留的盐及有机溶剂对后续的逆转录和PCR均存在不同程度的压制作用，因此在提取过程中应充分去除组织裂解液，洗涤时应充分，使管壁四周均能被洗涤到，另外管子空离和吹风是必须的步骤，会进一步降低有机物残留。

昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法：RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子。注意：大部分昆虫的28SRNA被切割成两个小的片段，彼此用氢键相连，所以在甲醛变性胶中，没有28S带出现。RNA产量产率测定：将5～10μLRNA溶于TE缓冲液中(pH7.5～8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8～2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。再采集样本之后马上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物质。

动物组织总RNA提取：1、尽量选取新鲜的组织，如果不是新鲜的（较好在三个月之内-80℃冰箱或者在液氮中冻存的。在剪取组织时，不要拿到室温直接剪取，一定要放到冰盒上，尽量避免反复冻融。2、用干净的剪刀镊子剪取一小块组织，剪取样本时尽量剪组织中心的部位，或者先将大块的组织先从中间切开，然后再在新鲜切口的位置剪取样本。取下的组织要充分的剪碎，将剪碎的组织放到无RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的组织要充分接触裂解液，准备匀浆。3、正常组织选取绿豆粒大小（30~60mg）的组织进行匀浆，如果组织中含有大量的蛋白、脂肪或者是紧密的纤维组织比如肝脏等，适当增减剪取组织的量（可选10~20mg）。4、如果提取的是鱼肌肉，虾肉，海蜇等含水分较多的组织时则应当适当提高样本量用量（推荐100~200mg）。5、条件允许的情况下，动物组织使用高通道组织匀浆机匀浆后即可直接进行提取步骤，如没有该设备。6、较后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以减少RNA的降解。植物RNA提取试剂：提取的总RNA纯度极高，没有蛋白和其他杂质的污染。长沙RNA提取试剂哪里买

RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。宁波RNA提取试剂厂家

植物RNA提取过程：植物组织成分相对于动物组织来说复杂多样，因此其RNA的分离和纯化的难度也随之加大，如果要完美的数据结果，那么提取纯度高、完整性好的RNA就成了关键所在。植物RNA的提取一般会经历以下几个过程：1.破碎细胞壁。2.裂解细胞膜。3.杂质去除，包括：DNA、蛋白质、多糖、多酚、次生代谢产物等。4.纯化和浓缩RNA。而在RNA提取过程中，纯化除杂的过程是影响RNA纯度的关键所在。在完整的细胞内，多糖多酚类化合物，次级代谢产物，蛋白质如RNase等与核酸是分离的，一旦细胞破碎，这些物质就不可避免的会与RNA发生相互作用。宁波RNA提取试剂厂家