宁波济南RNA提取试剂

动物组织总RNA提取：1、尽量选取新鲜的组织，如果不是新鲜的（较好在三个月之内-80℃冰箱或者在液氮中冻存的。在剪取组织时，不要拿到室温直接剪取，一定要放到冰盒上，尽量避免反复冻融。2、用干净的剪刀镊子剪取一小块组织，剪取样本时尽量剪组织中心的部位，或者先将大块的组织先从中间切开，然后再在新鲜切口的位置剪取样本。取下的组织要充分的剪碎，将剪碎的组织放到无RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的组织要充分接触裂解液，准备匀浆。3、正常组织选取绿豆粒大小（30~60mg）的组织进行匀浆，如果组织中含有大量的蛋白、脂肪或者是紧密的纤维组织比如肝脏等，适当增减剪取组织的量（可选10~20mg）。4、如果提取的是鱼肌肉，虾肉，海蜇等含水分较多的组织时则应当适当提高样本量用量（推荐100~200mg）。5、条件允许的情况下，动物组织使用高通道组织匀浆机匀浆后即可直接进行提取步骤，如没有该设备。6、较后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以减少RNA的降解。研钵150度烘烤4小时，离心管、吸头用DEPC处理。宁波济南RNA提取试剂

酵母总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)：一、原理简介。改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。二、试剂盒特点：1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。4、多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。5、有效的去除了无用的5S在总RNA中含量，提高了纯度。杭州RNA提取试剂厂家供应能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。

游离RNA(或称循环RNA,cell-freeRNA,简称cfRNA),即存在于细胞外的转录产物,包括mRNA和RNA,在人的多种体液中被普遍研究并成为疾病无创性诊断和研究的新分子标志物。文献总结了以下两个方面，一方面游离RNA主要来源于tumour细胞，另一方面tumour细胞来源有凋亡、坏死、主动释放三种机制，目前认为以凋亡为主。游离RNA的生物学特征：游离RNA的结构RNA相对DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病症患者血清中含有更高浓度的核糖核酸酶,病症患者血清中以RNA-蛋白脂复合物化学组成来保护RNA,半衰期大约为2天。本试剂盒采用独特的配方和添加剂，能高效的分离血清、血浆及其它无细胞体液等样品中分离出游离的RNA，另外本试剂还可以有效地压制各种外源性和内源性的RNA酶，同时结合特制的纯化柱，能较大限度的保持RNA的完整性、高得率以及纯度，并能保留小RNA，为需要进行小RNA研究，如RNA的用户提供了强有力的工具。

动物细胞RNA提取：1、悬浮细胞：可直接离心后弃掉培养基，用无菌PBS清洗1~2遍后，再用适量PBS悬浮起来，然后再加入裂解液进行裂解。千万不要完全弃掉液体后，往沉淀细胞里直接加入裂解液，这样会使外表层的细胞裂解后释放的组蛋白包裹粘附在沉淀细胞外侧，从而限制沉淀内部的细胞与裂解液的接触，从而导致细胞裂解不彻底，降低RNA得率。2、半贴壁或贴壁不紧的细胞：弃掉培养基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取适量PBS用吸管或者泵吹打培养皿，把细胞吹下来，转移到无RNA酶的EP管中，加裂解液进行提取。3、贴壁细胞：需要先用胰酶消化，然后收集到无RNA酶的EP管中，离心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以适量PBS重悬后继续进行提取步骤。再采集样本之后马上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物质。

拭子RNA提取试剂的选择？应有较高的提取得率。对离心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取决于离心柱对核酸的吸附能力、洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。离心柱的硅胶膜RNA吸附性能好、裂解液细胞裂解能力强、洗脱液洗脱能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果离心柱硅胶膜吸附能力不好，裂解液和洗脱液没有经过很好的优化，RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的确定，我们可以使用紫外分光光度法，但是不能作为判断得率的单独标准，较好还是要做个PCR或荧光定量。血浆/血清RNA提取试剂盒：30~40分钟内即可完成提取过程，提取的总RNA纯度高。太原正规RNA提取试剂单价

植物RNA提取试剂：采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统。宁波济南RNA提取试剂

植物RNA提取：植物组织中，富含酚类化合物，或富含多糖，或含有某些尚无法确定的次级代谢产物，或RNase的活性较高。这些物质在细胞裂解后与RNA紧密结合形成难溶复合物或者胶状沉淀，很难将其去除。所以我们在提取植物组织时，要选取针对植物的试剂盒，试剂盒里的裂解液能有效解决多酚易氧化、多糖化合物与核酸分离等难题。1、植物的果皮、果肉、种子、叶片等要在研钵中充分研磨，研磨过程中液氮要及时补充，避免样品融化，研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀，避免RNA降解。2、像水稻及小麦叶片等富含纤维的样本，则应适当减少提取用量，否则组织研磨及裂解不彻底，会使提取的RNA产量较低。3、含水分较多的植物组织例如石榴果实、西瓜果实、桃子果实等则应当适当提高样本量（可选100~200mg）。4、植物组织，如植物叶片、根茎、坚硬的果实等材料一般建议使用液氮在研钵中彻底研钵成份，再继续进行提取步骤。常规的组织匀浆机对植物组织的匀浆效果可能不佳，一般不建议使用。宁波济南RNA提取试剂