RNA指的是核糖核酸。真核生物体的遗传物质存在于细胞核内,多数的真核生物使用DNA也就是脱氧核糖核酸来作为遗传的中心物质,但是少量的病菌遗传物质可以是RNA。正因为病菌的遗传物质是RNA,所以可以通过检测病菌的RNA是否存在,或者其浓度和含量来判断是否存在相应的病菌传染,传染的程度及病菌是否仍在大量复制。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的缩写。存在于生物细胞以及部分病菌、类病菌中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。即用型RNA,可在绝大多数下游应用。上海石家庄RNA提取试剂
RNA提取试剂盒原理:该EpiQuik™总RNA提取试剂盒提供了一种快速,简单,经济有效的方法,可从全血,哺乳动物细胞,细菌细胞和菌类细胞中分离总RNA。优化的洗涤剂和离液盐用于裂解细胞并灭活核糖核酸酶。专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上,同时使污染物通过柱被有效地洗去。纯的RNA用RE缓冲液洗脱,不用酚提取或醇沉淀。 RNA提取试剂盒特点:1、快速程序在25-40分钟内提供高质量的总RNA。2、即用型RNA,可在绝大多数下游应用,例如RT-PCR,cDNA合成,Northern Blotting,Differential display,Primer Extension, mRNA selection。3、适用样品:全血,哺乳动物细胞,细菌细胞和菌类细胞(样品起始量:300μl全血,10 ^ 7个哺乳动物细胞,10 ^ 9个细菌细胞和10 ^ 8个菌类细胞。总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。总RNA的产量可达30μg。产量可能因样品类型而异。)唐山正规RNA提取试剂用于各种植物、动物、微生物的RNA提取,在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。
科学家曾经在实验室里就成功地让RNA实现了自我复制的功能。不仅如此,还有科学家构建了一种DNA-RNA杂交基因组的大肠杆菌。这个实验证明,即使有DNA-RNA的杂交链的中间态,生物也不至于会死亡。所以,RNA较早可能给就是生物的遗传物质,只是后来逐步被替代了。当然,还有一些次要的原因,比如,我们都知道DNA是在细胞核当中的,完成生命活动这些步骤其实都在细胞核外进行,因此这样其实更加安全。而如果是RNA,那就没有必要存在细胞核了,但是当细胞损失时,就很容易出现问题。因此,DNA后来逐渐取代了RNA作为生物的遗传物质。但这并不是说RNA不能够作为遗传物质,相反它是可以作为遗传物质而存在的。
RNA提取注意事项:使用时一定要根据自己的实验需要购买**提取试剂盒, 如果不是**试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。当前提取效果好的是RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货(国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种)等,其价格比进口试剂盒要便宜许多,且效果还不错,性价比还可以。在提取时,实验人员需要佩戴口罩和手套等各种防护装备,以防实验室污染。
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质。深圳RNA提取试剂价格
提取的RNA样品中不应存在对酶存在压制作用的有机溶剂及过高浓度的金属离子。上海石家庄RNA提取试剂
RNA 提取关键点:RNA 的产量和质量也是另无数人头疼的问题,较佳方法是保证样品完全裂解,但相同的裂解方案换了一个样本可能就没辙了。为了提高裂解效果,可以将裂解缓冲液与机械裂解步骤(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。BIOG 血液RNA快速提取试剂盒是公司研发团队在综合比较了国外同类较好产品的基础上反复研制优化而成,专门用于血液RNA的快速提取纯化。本试剂盒采用独特的裂解液配方,可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的RNA,操作简便快速,只需15分钟即可完成血液RNA提取。RNA提取得率较高,可在200μL全血中提取5μg左右RNA。BIOG 血液RNA快速提取试剂盒采用了较新的较好离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,有效地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,特别适用于血液包括细菌、病菌等传染的分子检测。上海石家庄RNA提取试剂
苏州君欣生物科技有限公司位于江苏省张家港市塘桥镇东城科技创业园C幢二楼,交通便利,环境优美,是一家生产型企业。是一家有限责任公司企业,随着市场的发展和生产的需求,与多家企业合作研究,在原有产品的基础上经过不断改进,追求新型,在强化内部管理,完善结构调整的同时,良好的质量、合理的价格、完善的服务,在业界受到宽泛好评。公司拥有专业的技术团队,具有原代细胞,无血清细胞冻存液,干细胞无血清培养基,动物疾病模型等多项业务。苏州君欣生物科技以创造***产品及服务的理念,打造高指标的服务,引导行业的发展。
游离RNA(或称循环RNA,cell-freeRNA,简称cfRNA),即存在于细胞外的转录产物,包括mRNA和RNA,在人的多种体液中被普遍研究并成为疾病无创性诊断和研究的新分子标志物。文献总结了以下两个方面,一方面游离RNA主要来源于tumour细胞,另一方面tumour细胞来源有凋亡、坏死、主动释放三种机制,目前认为以凋亡为主。游离RNA的生物学特征:游离RNA的结构RNA相对DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病症患者血清中含有更高浓度的核糖核酸酶,病症患者血清中以RNA-蛋白脂复合物化学组成来保护RNA,半衰期大约为2天。本试剂盒采用独特的配方和添加剂,能高效的分离血清...