广州RNA提取试剂销售厂家

总RNA提取试剂试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如，从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7kb和15kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分)，两条优势核糖体~5kb(28S)和~2kb(18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间(tRNA,5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通琼脂糖凝胶电泳，28S的位置大约在2kb，18S大约在1kb的位置，不同浓度的凝胶位置变化较大。注意事项：样品用总RNA提取试剂匀浆后，如果不即刻加入氯仿之前，置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，NorthernBlot等总RNA提取试剂：自备新开封或专门氯仿，异丙醇，75%乙醇，DEPC处理水。广州RNA提取试剂销售厂家

提取RNA的详细步骤：首先，将研钵晾干够，倒入1/3体积的液氮，加入0.2g均质的植物材料，充分研磨后转入一个含有300微升GMT的1.5ml的离心管中，摇匀。然后，加入30微升2mol/lNaAc进行摇匀，加入300微升酸酚摇匀，加入100微升的氯仿摇匀。然后，在四摄氏度12000r/min下离心二十分钟，吸取上清液的3/4，加入等体积的异丙醇，于冰上放置十五分钟。然后，在四摄氏度12000r/min下离心十分钟，将沉淀悬浮于含100微升的4mol/lLiCl小试管中，于-20摄氏度下放置过夜。然后，在4摄氏度13000r/min下离心10-15min，将沉淀溶于0.4mlDEPC处理水中，加入1/2体积氯仿和1/2体积酸酚，摇匀，进行抽提，在4摄氏度13000r/min下离心五分钟。将上清液中加入等体积的氯仿摇匀，进行抽提，在四摄氏度13000r/min下离心五分钟，上清液中加入1/10体积3mol/lNaAc和两倍体积的午睡乙醇与-20摄氏度放置一小时。贵阳正规RNA提取试剂直销厂家RNA定量方法与DNA定量相似。

RNA提取浓度不高或质量不佳原因及解决办法：1、RNA降解：可能是提取样本本身降解，或者是在提取过程中导致的降级；应当尽可能使用新鲜样本进行RNA提取，采集的样本应当及时置于液氮或者-80℃冰箱冻存，并减少反复冻融。在RNA提取过程中应当使用RNase/DNasefree的吸头、离心管及其他材料，提取过程尽可能的快，提取后的RNA应置于冰盒上并及时放于-80冻存。如提取后的RNA需要进行凝胶电泳检测，则应提取好后立刻进行电泳，电泳缓冲液应更换新配制的。2、盐及有机溶剂残留：提取试剂中含有酚及胍盐，洗涤液中含有乙醇，在提取过程中裂解液吸弃不彻底，洗液没有充分晾干导致的，残留的盐及有机溶剂对后续的逆转录和PCR均存在不同程度的压制作用，因此在提取过程中应充分去除组织裂解液，洗涤时应充分，使管壁四周均能被洗涤到，另外管子空离和吹风是必须的步骤，会进一步降低有机物残留。

与DNA不同，RNA一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同，不过除了A-U、G-C配对外，G-U也可以配对。在细胞中，根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA），rRNA（核糖体RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的DNA所转录；tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；rRNA是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等，可调节基因表达。

昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法：将50～300mg昆虫组织放入10～15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5～20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎昆虫组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。室温12000rmp离心3～5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。较好留下100μL上清液不取。加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。常用RNA提取方法有：1TRIzol法；2TRIzol+过柱法；3CTAB+过柱法；4试剂盒法。珠海正规RNA提取试剂平均价格

tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者。广州RNA提取试剂销售厂家

酵母总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)：一、原理简介。改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。二、试剂盒特点：1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。广州RNA提取试剂销售厂家