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众所周知，RNA提取是一项困难的工作。常见的挑战包括RNA降解、低产率和/或纯度以及DNA污染。此外，不同的样品类型有自己独特的特性，需要特别注意。例如，微生物(如革兰氏阳性/阴性细菌、菌类、古生菌等)的细胞壁坚硬，不易被化学和酶解。其他样本类型，如粪便和植物含有压制剂(如多酚类、腐殖酸/黄腐酸、单宁酸等)，可与RNA共沉淀，并可压制下游分析，如RT-qPCR。RNA是不稳定的，极易降解。许多样品含有高水平的RNase，会快速降解RNA。为了使之较小化，较好在采集时稳定样本中的RNA。常用的样品稳定方法包括液氮快速冷冻、干冰乙醇浴或-80°C冷冻室。然而，这些方法也有缺点，如核酸的冻融损伤，并不是所有的研究人员在采集样品时都能立即使用这些方法。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂，非常方便，适合于RNA的快速提取。正规RNA提取试剂厂家推荐

RNA快速提取试剂盒：随着对小RNA的研究的逐渐深入，小RNA的分离逐渐成为一种需求，百泰克利用雄厚的研发实力，开发出高效快捷的小RNA分离纯化试剂盒，对各种不同来源的样品（动物、植物、细胞等）均取得满意的效果。miRNA提取试剂盒采用自创的结合洗脱技术，对小RNA，包括RNA(miRNA)、smallinterferingRNA(siRNA)、smallnulcearRNA(snRNA)均能很好的回收。产品特点：高效分离小RNA，同时分离总RNA。富集200nt以下的小RNA，增加其用于下游实验的浓度。快速——30分钟完成实验。可用于miRNA、siRNA、shRNA和snRNA分析。适用于各种来源的样品。南京正规RNA提取试剂服务电话再采集样本之后马上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物质。

RNA提取试剂盒原理：该EpiQuik™总RNA提取试剂盒提供了一种快速，简单，经济有效的方法，可从全血，哺乳动物细胞，细菌细胞和菌类细胞中分离总RNA。优化的洗涤剂和离液盐用于裂解细胞并灭活核糖核酸酶。专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上，同时使污染物通过柱被有效地洗去。纯的RNA用RE缓冲液洗脱，不用酚提取或醇沉淀。RNA提取试剂盒特点：1、快速程序在25-40分钟内提供高质量的总RNA。2、即用型RNA，可在绝大多数下游应用，例如RT-PCR，cDNA合成，NorthernBlotting，Differentialdisplay，PrimerExtension，mRNAselection。3、适用样品：全血，哺乳动物细胞，细菌细胞和菌类细胞（样品起始量：300μl全血，10^7个哺乳动物细胞，10^9个细菌细胞和10^8个菌类细胞。总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。总RNA的产量可达30μg。产量可能因样品类型而异。）

Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。原理:在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。异硫氰酸胍氯化铯超速离心法:原理：使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效压制RNA酶的活性，经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质，进行密度梯度超速离心，RNA沉淀于管底，而DNA与蛋白质在上清液中。使用这种方法，不但能得到高质量的RNA，而且能同时分离出细胞染色体DNA。适用样品：全血，哺乳动物细胞，细菌细胞和菌类细胞。

RNA提取注意事项：1、组织样本要尽可能的新鲜，避免反复冻融。2、提取时组织要充分研磨，组织量不宜过少，更不宜过多。3、加入裂解液后应给予充分的孵育时间，使样本充分裂解。4、在用Trizol法提取时，分层后吸取上清的原则是“宁愿少吸，不能多吸”，千万不能提取到中间层，否则会导致严重的基因组DNA污染。5、洗涤时洗涤液应充分浸润到管壁的四周，确保洗涤彻底。6、柱式提取法，洗涤完后除了对柱子进行空离后，还应当将吸附柱置于超净台内吹风5~10min，使有机溶剂充分挥发干。7、柱式法较后洗脱时候，当加入DEPC水后还应孵育3~5min，或者提前将DEPC水加热至60℃，可提高洗脱得率。传统的Trizol裂解异丙醇沉淀法较后RNA是用DEPC水溶解沉淀，则应当给予适当溶解时间，并用泵头不断吹吸离心管底部。买点无酶的吸头、离心管，找一个普通的试验台，穿好实验服戴好手套，保护好自己就好。长沙正规RNA提取试剂价格

排除其它核酸分子（DNA）的污染。正规RNA提取试剂厂家推荐

动物细胞RNA提取：1、悬浮细胞：可直接离心后弃掉培养基，用无菌PBS清洗1~2遍后，再用适量PBS悬浮起来，然后再加入裂解液进行裂解。千万不要完全弃掉液体后，往沉淀细胞里直接加入裂解液，这样会使外表层的细胞裂解后释放的组蛋白包裹粘附在沉淀细胞外侧，从而限制沉淀内部的细胞与裂解液的接触，从而导致细胞裂解不彻底，降低RNA得率。2、半贴壁或贴壁不紧的细胞：弃掉培养基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取适量PBS用吸管或者泵吹打培养皿，把细胞吹下来，转移到无RNA酶的EP管中，加裂解液进行提取。正规RNA提取试剂厂家推荐