关于血清溶解正确的操作我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8C冰箱24小时左右使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中,无论室温的水或者37℃的水,因为在水浴中血清迅速熔化,很大的温差(-20℃到37℃,温差为57℃)极其容易造成血清产生沉淀。何谓热灭活?一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和焕活。我们注重产品质量,云海生物的猪血清无病毒、无污染,让您使用更放心。潍坊猪血清哪里有卖
血清的使用1、血清的热灭活:进行热灭活的目的是,利用较高的温度使补体失活。由于胎牛血清会严格控制采集血时间为5-8月龄的胎牛,此时还未形成完整的补体系统,因此,合格的胎牛血清,是不需要灭活的。但是实验中如果需要新生牛血清、小牛血清、猪血清或马血清这些血清时,则需要根据实验要求而定。根据血清厂家多年来总结的经验,常规解冻后,40℃水浴加热20分钟即可,能够尽可能地保留营养成分。2、细胞培养的应用:对于新的细胞系或从无血清培养转变到胎牛血清培养的细胞系,需要进行适应期。在初始适应期,可以将血清浓度逐渐降低,直到细胞适应无血清培养为止。3、关注血清的批次:相同品牌的胎牛血清,在蛋白质含量等方面,可能会存在批次差异,因此在同一实验中好使用来自同一批次的血清,以减少变异性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,请进行验证实验以确保结果的可重复性。潍坊动物血清订购我们的胎牛血清采用先进的生产工艺,保证了其高纯度和优异的质量。您可以放心使用,无需担心任何质量问题。
1.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。2.热灭活本产品除注明外均未灭活。假如有必要灭活,请严厉依照56℃30分钟(水浴)处理已冻住血清。3.血清冻住比较好选用逐步冻住法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),冻住过程中有必要随时轻摇,使血清受热温度均匀。4.血清凝絮物,血清冻住后会出现少数片状或絮状物分出,这首要是因为血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白分出构成沉积物,试验证明沉积物不会影响血清本身质量。避免马血清沉积物的发生:1.冻住血清时,请依照所建议的逐步冻住法(-2O℃至4℃至室温),若血清冻住时改动的温度太大(如-20℃至37℃),试验显现非常简略发生沉积物,2.冻住血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,削减沉积的发生。3.血清的热灭活非常简略形成沉积物的增多,若非必要,能够无须做此过程。4.请勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,一起血清中许多较不稳定的成分也会因而遭到危害,而影响血清的质量。5.若有必要做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,而且随时摇晃均匀。
血清出现沉淀的问题:血清非人工产品,有些东西沉淀出来系自然现象;纤维蛋白原、盐析出,如磷酸钙等;胆固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情况下还会增加:热灭活、37℃培养(常常由此引发歧异)、反复冻融、熔化中没有摇匀、gamma照射、长期存放在2-8°C。另外我们还发现:血清加入到RPMI1640中时,沉淀往往会发生或增加:pH升高时,沉淀会增加;在培养板或培养皿中,因为培养基的蒸发也会导致沉淀的增加。如何避免血清中产生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质;(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。选择云海生物的新生牛血清,就是选择信赖与品质,我们始终致力于为客户提供专业的产品。
一、外观拿到血清,先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要。1、颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采集血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的采集血点很分散,大多是由屠户采集血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量的呈现出淡黄、微红色,如Gibco16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活的血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。我们的马血清经过严格的质量控制,确保每批产品的稳定性和一致性,让您的实验数据更加准确。潍坊动物血清订购
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鸡血清提取丁酰胆碱酯酶试验以通过离心提纯鸡血清得到的胆碱酯酶,继续进行农药残留相关敏感性检验,检验中同样采用Ellman法。探究鸡血清丁酰胆碱酯酶的酶学特性及其对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性[8],为农药残留的快速检验提供新的敏感酶源。虽然很多报道指出,丁酰胆碱酯酶对农药存在敏感性,但大多数试验研究对象都为马血清提取的丁酰胆碱酯酶,并没有用鸡血清进行比较,而李维[10]在试验前期对多种动物血清内丁酰胆碱酯的农药敏感性比较中发现;鸡血清内丁酰胆碱酯的农药敏感程度优于其他试验数据的禽畜类动物血清。并提供了体外丁酰胆碱酯酶对农药敏感性的基础研究结果,鸡血清中丁酰胆碱酯酶的比较适反应活性为35℃,pH值8.0;对农药的敏感测试反应中不存在过量底物的抑制效应,尤其对毒扁豆对碱性表现敏感试验中发现相比于马血清的丁酰胆碱酯酶,鸡血清的丁酰胆碱酯酶对盐酸多奈哌齐较为敏感,在通过试验中5种农药对2种酶活性抑制率的比较后发现,除了克百威外,鸡血清中的丁酰胆碱酯酶对其他4种农药的敏感性均高于马血清中的丁酰胆碱酯酶。因而,鸡血清中丁酰胆碱酯酶在含量丰富的同时对多种农药的敏感程度还高,必然可以作为检测源应用于酶抑制法检验中。潍坊猪血清哪里有卖