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血清出现沉淀的问题:血清非人工产品,有些东西沉淀出来系自然现象;纤维蛋白原、盐析出,如磷酸钙等;胆固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情况下还会增加:热灭活、37℃培养(常常由此引发歧异)、反复冻融、熔化中没有摇匀、gamma照射、长期存放在2-8°C。另外我们还发现:血清加入到RPMI1640中时,沉淀往往会发生或增加:pH升高时,沉淀会增加;在培养板或培养皿中,因为培养基的蒸发也会导致沉淀的增加。如何避免血清中产生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。云海生物鸡血清,经过严格的生物安全检测,确保产品的安全性和稳定性,为您提供可靠的研究保障。滨州猪血清品牌
何谓热灭活?有必要做热灭活吗?一般以56℃、30分钟来处理已解冻的血清,因为这一加热步骤可使补体去活性。补体所参与的反应有:溶细胞活性、平滑肌的收缩、肥大细胞和血小板组胺的释放,可增强吞噬作用,促使淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激丨活。实验显示,经过正确处理的热灭活丨血清,对大多数的细胞而言是不需要的。因为,经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,常会让研究者误以为是血清遭受污染。而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。因此,若非必须,可不做热灭活。滨州猪血清品牌云海生物鸡血清,富含丰富的生物活性因子和营养物质,能够有效促进细胞生长和增殖,加速实验进程。
根据牛的取血年龄可以区分:胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹心脏穿刺采集血得来的血清。国产胎牛血清(并无明确定义,但通常用此命名)指的是出生4-6小时,且未进行哺乳(unsuckled)进食的新生牛,有时还称作国产新生牛血清。适用于常规细胞培养、细胞株保存和单抗研制等方面。新生牛血清(NewbornCalfSerum,简称NBCS,或称小牛血清)指的是出生14天-3个月进行取血的牛血清。适用于培养或对环境要求低的细胞。成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛血清。适用于多种动物体外培养,包括:克隆细胞、单层细胞、悬浮细胞等。以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。
如何判断牛血清的好坏?我们可以根据血清的内毒d素含量、血红蛋白含量、总蛋白含量等指标,将胎牛血清分为三个等级。1、外观根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量好的呈现出淡黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。2、沉淀进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。3、澄清度进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。云海生物鸡血清,具有优异的稳定性和耐受性,能够适应各种细胞培养条件,为您的研究提供持久的支持。
马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。羊血清用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。选择云海生物鸡血清,无病原体污染,确保实验结果准确可靠。淄博马血清品牌
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血清的颜色如何?为何有的胎牛血清颜色偏红,而有的偏黄?是因为胎牛血清颜色是由血红蛋白(鲜红)和胆红素(黄)决定的,主要是受血红蛋白影响。血红蛋白含量很低时,含少量胆红素,呈淡黄或金黄。血红蛋白含量高时,会呈现淡红色。需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。本公司血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常非常非常(重要的事情说三遍)低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。滨州猪血清品牌
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