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四环素血清应用于使用敏感四环素诱导表达系统的细胞培养(Tet-on, Tet-off),以及其它对四环素敏感的实验中。IR (辐照)钴60伽马辐照剂量在3.5Mrad. 通过直接与间接作用将生物大分子(如核酸)键结破坏,人畜用药物/疫苗,及对微生物负荷(Bioburden)要求比较高水平的实验。7HI (热灭活)处理血清56℃, 30Min, 破坏补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。血清的筛选验证主要包括:形态验证、增殖能力测试和克隆形成能力测试。猪血清批发
按物种分类马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。兔血清正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。泰安马血清哪家好提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
放射免疫法以不同稀释度的抗血清与质量标记抗原混合,孵育24h后,测定其结合率。通常以结合率为50%的血清稀度和为效价。如某抗血清的结合率为50%时的稀释度为1:15000,则该血清的效价就是1:15000。抗血清的效价,除由抗血清本身的性质决定外,还受标记抗原的质量、孵育时间,所用稀释液的成分及其pH等因素的影响,在工作中必须引起注意。(2)双向扩散法利用大分子抗原和抗体在琼脂平板上扩散,两者在相交处产生沉淀线,以观察和判断抗血清中是否有抗体及其浓度。球脂板的制备:100mlpH7.1的磷酸盐缓冲液加到15g的琼脂内,于水浴中加温搅拌,使琼脂完全溶解,趁热用纱布过滤,待溶液冷却到65°C左右时,加入叠氮钠(NaN3),使其在溶液中的浓度为0.1%。用移液管把琼脂放在干净平皿或玻片上,约3mm厚,待其冷却,完全凝固后,用打孔器打孔。中间孔内加适量抗原(容量为50ul)周围各孔内分别加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀释的抗血清,37°下孵育24h,观察有无沉淀线产生,以判断血清的稀释度。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4°C下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合,用振荡器混匀成乳状,也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨,均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再继续研磨成乳剂,润十水水上10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原,亦可用一注射器装抗原液,另一注射器装佐剂,二者以聚乙烯塑料管连接,然后二者来回反复抽吸,约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原剂量,头次剂量为300~500ug,加强免疫的剂量约为头次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂,头次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。在第2次加强免疫后2周,从耳缘静脉取2~3ml血,制备血清,检测抗体效价。如未达到预期效价,需再进行加强免疫,直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时,即可放血制备抗血清。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。
如何进行血清灭活处理?血清请先按上述「血清应如何融解」中的操作步骤融化和混匀,热灭活时请将血清置于56℃水浴30分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。比较好准备同样的容器装相等体积的水(与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入56℃水浴,在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时轻轻旋转混匀血清,当温度计显示达到56℃左右,开始计时。56℃水浴后,建议马上转移到冰上降温。因为血清供体已与环境长期接触,体内免疫系统已经经历了一场又一场的战斗,而保留了抗体、补体等。德州猪血清批发
原则上血清添加量不要太多,通常分为5%、10%、20%几档。猪血清批发
瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.猪血清批发
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