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抗血清的采集与保存家兔是很常用以产生抗体的动物,因此这里主要讨论兔血的收集。羊等较大动物以颈静脉、动脉取血,鼠等小动物取血可参阅有关资料。取兔血有两种方法,一是耳缘静脉或耳动脉放血,一是颈动脉入血,也可心脏采集血。取动脉或静脉放血时,将免放入一个特造的木匣或笼内,耳露于箱(笼) 外,也可由另一人捉住兔身。剪去耳缘的毛,用少许二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管扩张、充血。用手轻拉耳尖,以单面剃须刀或尖的手术刀片,快速切开动脉或静脉,血液即流出,每次可收集30~40ml。然后用棉球压迫止血,凝血后洗去二甲苯。二星期后,可在另一耳放血。此法可反复多次放血。颈动脉放血时,将免仰卧,固定于兔台,剪去颈部的毛,切开皮肤,暴露颈动脉,插管,放血。放血过程中要严格按无菌要求进行。收集的血液置于室温下1h左右,凝固后,置4°C下,过夜 (切勿冰冻) 析出血清,离心,4000rpm,10min。在无菌条件,吸出血清,分装 (0.05~0.2ml) ,贮于-40°C以下冰箱,或冻干后贮存于4。C冰箱保存。富含一些可供贴壁细胞型细胞贴壁生长的基质成分。甘肃猪血清厂家直销
当科技变得越来越先进的时候,就给人们做实验研究带来很大的帮助。现在做细胞研究的人是由很多的,就有一部分人是做动物细胞研究,不过因为动物细胞相对较复杂,研究起来就很困难,对功能也不是很了解,动物在代谢的进程中所需的养分包含水、无机盐、维生素、糖类、脂肪、氨基酸和纤维素等。这些成分动物血清都能够供给给体外培育的动物细胞,但这些养分物质(除水以外)的含量在动物血清中所占的份额很少,并且首要的养分物质在动物细胞培育基的制造中现已增加了。所以,从这些视点看动物细胞培育参加的动物血清虽然能起到为培育的动物细胞供给养分物质的效果,但这并不是首要的效果。动物细胞的代谢离不开调理。在动物体内有两种调理方法来保持动物代谢的稳定,而细胞本身的代谢调理中调理的效果很关键。血清中供给了适量且份额适中的各式各样的激从来确保动物细胞离体后的正常代谢。苏州羊血清培养基夏天在常温下即可,冬天要在20-30℃下静置30-45分钟。
血清的分类根据取血年龄的不同,血清有以下分类:取血牛龄主要受当地畜牧业发展情况及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专为取血而养的牛。01胎牛血清(FetalBovineSerum,简称FBS)取自尚未出生,母牛剖腹心脏穿刺取血得到的血清。02国产胎牛血清(并无准确定义,但通常以此命名)出生4-6小时,未进行哺乳进食的新生牛,也有称作国产新生牛血清。03新生牛血清(NewbornCalfSeurm,简称NBCS)也有称作小牛血清,指的是出生14天-90天的进行取血的牛血清(也有说是指出生10天-90天)。04成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指取血时牛龄超过6个月的牛血清。
按物种分类马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。兔血清正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。在一些情况下,中和毒性物质维护细胞不受损害。
⚑血清应如何保存?未拆封的血清应存放于-15至-20℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于-15至-20℃,2~8℃溶解后建议尽快使用。⚑血清的有效期是多久?大部分血清效期是5年,针对每个批次,请通过质检文件确定具体效期日期。⚑血清应如何融解?取出的血清置于2~8℃融化,不时旋转混匀,充分融解后分装或使用。⚑为什么有时血清中出现絮状沉淀?是否需要去除?如何去除?多种原因可能导致絮状沉淀的形成,比较常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。采集血液样品后,倾斜30-45度角放置好。苏州羊血清培养基
作用是提供基本营养物质、和各种生长因子、结合蛋白、促接触和生长因子。甘肃猪血清厂家直销
IR(辐照)血清辐照型血清是将正常血清经过三次无菌过滤后再用钴-60辐射灭菌制得的血清。辐照血清是细胞培养中比较重要的天然培养基,它具有促进细胞增殖和诱导细胞分化等的生物学功能其质量的好坏直接影响着生物制品的安全性。功能:提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。应用适用于正常封闭与增殖旺盛的常规细胞系的培养等。甘肃猪血清厂家直销
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