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常规细胞培养需要添加血清来维持细胞的增殖能力,尽管血清可以满足一般细胞培养需求,但在进行营养成分优化和标记特定成分进行研究的实验中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是将血清循环通过中空纤维,并在血清中补充生理盐水以维持渗透压,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于关注小分子浓度的特殊研究,包括:研究蛋白质组学、同位素标记、细胞信号传导和报告基因分析、报告基因细胞系的筛选等。血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸,蛋白质,维生素(特别是脂溶性维生素如A,D,E,K)。浙江羊血清
避免产生沉淀物1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。无锡马血清订购真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂,一般表现出微红色或橘红色。
⚑血清应如何保存?未拆封的血清应存放于-15至-20℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于-15至-20℃,2~8℃溶解后建议尽快使用。⚑血清的有效期是多久?大部分血清效期是5年,针对每个批次,请通过质检文件确定具体效期日期。⚑血清应如何融解?取出的血清置于2~8℃融化,不时旋转混匀,充分融解后分装或使用。⚑为什么有时血清中出现絮状沉淀?是否需要去除?如何去除?多种原因可能导致絮状沉淀的形成,比较常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。如果在37℃或更高的温度解冻血清,血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶,但不改变血清的性能,同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。浑浊和沉淀所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白,导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装到无菌离心管中,以低速离心1~2min,上清液即可直接加入到培养基内使用。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。供应蛋白酶克制剂,维护细胞免受死细胞开释的蛋白酶的损害。
1989年左右,也有国外学者建议用猪血清取代牛血清,用于培养制造非洲猪瘟病毒的细胞(见《动物检疫》1991年01期《猪血清中的牛血清白蛋白抗体引起非洲猪瘟血清学诊断的假阳性反应》),原因是牛血清中的白蛋白会干扰非洲猪瘟抗体的检测,造成假阳性反应。其他动物源血清兔血清:兔血清通常从六个月或更小的动物身上收集,可用于与BSA结合用作免疫细胞化学[1]和免疫组织化学中的封闭血清。山羊血清:多用做封闭液,也有一些研究人员发现,质量的山羊血清可用于某些细胞的培养。鸡血清:从屠宰供人类食用的健康鸡中收集的。有研究用于血清维生素B12的放射性同位素稀释测定 动物血清补偿根底培养基中没有或量缺少的营养成分。陕西马血清生产商
巧在人们发现这些成分不耐受高温,所以才有了热灭活处理。浙江羊血清
如何进行血清灭活处理?血清请先按上述「血清应如何融解」中的操作步骤融化和混匀,热灭活时请将血清置于56℃水浴30分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。比较好准备同样的容器装相等体积的水(与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入56℃水浴,在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时轻轻旋转混匀血清,当温度计显示达到56℃左右,开始计时。56℃水浴后,建议马上转移到冰上降温。浙江羊血清
山东云海生物科技有限公司公司是一家专门从事猪血清,鸡血清,马血清,牛血清产品的生产和销售,是一家生产型企业,公司成立于2015-03-09,位于山东省青岛市黄岛区刘公岛路71号5号楼。多年来为国内各行业用户提供各种产品支持。在孜孜不倦的奋斗下,公司产品业务越来越广。目前主要经营有猪血清,鸡血清,马血清,牛血清等产品,并多次以精细化学品行业标准、客户需求定制多款多元化的产品。我们以客户的需求为基础,在产品设计和研发上面苦下功夫,一份份的不懈努力和付出,打造了云海生物产品。我们从用户角度,对每一款产品进行多方面分析,对每一款产品都精心设计、精心制作和严格检验。猪血清,鸡血清,马血清,牛血清产品满足客户多方面的使用要求,让客户买的放心,用的称心,产品定位以经济实用为重心,公司真诚期待与您合作,相信有了您的支持我们会以昂扬的姿态不断前进、进步。
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