注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。推荐用于骨和软骨的染色。福建咨询糖原染色试剂盒销售厂家
网状纤维染色:网状纤维是非常细而短的纤维,大量堆积时则形成致密的网状,故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少,它多分布在结缔组织与其它组织交界处,如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内,血管周围以及造血部位,内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。网状纤维的变化,反映了疾病的发生和发展的不同过程,对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂,都是病理检验的重要指标,尤其是在临床病理诊断中,可根据其存在和分布来鉴别与肉瘤。而在HE染色标本上,网状纤维不易显色。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置~江苏如何使用糖原染色试剂盒厂家直销通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2)0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂配制:(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml)20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。
染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。将动物杀死后迅速取出所需要的组织。
糖原D-PAS染色液:使用方法:1、两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理,入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5~10min。4、入过碘酸溶液,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染10~20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液,染细胞核1~2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2~5s。10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明,中性树胶封固。在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。山东哪家生产糖原染色试剂盒厂家批发价
自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。福建咨询糖原染色试剂盒销售厂家
糖原染色生物技术优势:(1)拥有针对不同组织的特殊固定液;(2)拥有日本进口的各种染料,保证切片染色效果;(3)拥有千锤百炼的专业人才队伍,保证实验快速、有效的完成。实验样本要求:(1)植物材料在选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分;(2)动物材料取用时需对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和,或将动物杀死后迅速取出所需要的组织;(3)取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要,应该尽可能割取生活着的组织块,并随即投入固定液,固定液与组织块的体积比应在10:1;(4)切取材料时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤;(5)切取的材料应小而薄,便于固定液迅速渗入内部。一般厚度不超过3mm,大小不超过5×5m㎡。福建咨询糖原染色试剂盒销售厂家
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:纯酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精配制1)过碘酸酒清夜配法:过碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml)5ml蒸馏水10ml保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml纯酒精23ml4)亚硫酸...