病理切片操作规范:巨检结束后点清块数,记录签收。组织包埋完成后进行清点蜡块数量。大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3小时。固定液必须及时更换,固定后必须流水冲洗。固定、脱水温度不得高于37℃。包埋用石蜡必须过滤。试剂必须及时更换。切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。组织片贴附,应在除去标签位置后玻片的中间。封固前必须经酒精充分脱水,二甲苯透明,湿封。
制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。 H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固 常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美家的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。质量组胚病理切片***的选择病理切片类型如何正确选择?
切片法:徒手切片法。徒手切片法简单省时,容易掌握,虽有一定局限性,但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法。徒手切片分选材、持物、切片、取片、选片和装片等步骤。石蜡切片法。石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂,具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,也因火棉胶有韧性,切片不致有折卷或破裂,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。
制作病理切片脱水透明 标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。 脱水的步骤是:80%、90%、95%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。 **也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、**等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。组胚病理切片的主要用途是什么?
将玻片放到显微镜下,可以看到神奇的微观世界,在观察之前,玻片的制作,放置都需要小心谨慎,防止玻片的损坏,以及在观察的时候出现失误,那么你知道在制作玻片的时候经常遇到的问题?组织发脆:一般是脱水、透明、浸蜡时间过长、温度过高,并与组织本身质地也有关,在玻片时,边切边用嘴向蜡片吹气,可能会好些。玻片卷起,可能是刀不锋利,或刀锋在另一面,或刀角度过大,玻片太厚等等。蜡片弯曲:可能是刀锋不均,玻片刀未磨直,玻片刀与蜡块不平行。
病理切片制作时的浸蜡是什么操作?山西质量组胚病理切片
病理切片如何进行查看?湖南质量组胚病理切片
制作病理切片浸蜡、包埋 (1)使石蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。 (2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包在其中,称蜡块,此过程称为包埋。 5.制作病理切片切片和贴片 (1)修整蜡块:可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。 (2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪 (3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。 (4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。 (5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,石蜡切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的张力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。 (8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的石蜡。湖南质量组胚病理切片
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