染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。病理切片的取材好坏影响切片质量。正规组胚病理切片质量材质上乘
取一定大小的病变组织,用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里,用切片机切成薄片,再用苏木精-伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变。 病变的发展过程,***作出病理诊断。制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理,使之固定硬化,在切片机上切成薄片,粘附在玻片上,染以各种颜色,供在显微镜下检查,以观察病理变化,作出病理诊断,为临床诊断和提供帮助。在常规组织制片中,切片是相当重要的技术之一,其质量好坏直接影响标本的观察效果。好的切片机是整个制备过程的重要环节,要制备1张好的切片,病理工作人员必须将技术、知识和技巧进行完美的结合。首先,待切样品的质量是关键因素,而样品质量取决于前期处理工作的准确无误,包括固定、脱水、包埋等[2];必须选择正确型号的切片机以及合适的钢刀或一次性刀片;切片时需认真考虑样品类型、大小、厚度,兼顾操作者的便利性和舒适性。其次,要切出高质量的切片,操作者丰富的经验必不可少。操作者必须懂得切片机的工作原理,对机器进行精细调节以达比较好效果;能应对常见故障,一些潜在的影响因素浙江正规组胚病理切片病理切片为什么要进行固定呢?
用包埋剂来支持组织的过程称包埋。常用的是石蜡包埋法。包埋的关键一是平整,二是方位。要求在包埋时,应采用镊子轻压组织块拱起部份,使之平贴于底部,通常采用组织的*大面包埋。囊壁、管腔组织应竖直包埋。小块多颗组织,应尽量放在一起,并保证在一个平面上。修去两边的余蜡(所谓的两边,指切片时与切片刀垂直的两侧)。包埋时还应注意有无缝线,纸絮,如有一定要去除。胃黏膜活检标本,不能按一般的规律取*大包埋面,应采取窄面竖起包埋。包埋的蜡更应过滤,留有杂质的石蜡,容易造成污染或刀口受损。蜡的熔点应在56~58℃之间选择,不提倡在冬天使用软蜡。
切片法:徒手切片法。徒手切片法简单省时,容易掌握,虽有一定局限性,但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法。徒手切片分选材、持物、切片、取片、选片和装片等步骤。石蜡切片法。石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂,具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,也因火棉胶有韧性,切片不致有折卷或破裂,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。 病理切片用途新乡维克科教来为您解答。
如果切片出现厚薄不均:可能是刀、刀座及蜡块未夹紧,组织太硬,或玻片机主轴太向前,或玻片机已磨损。玻片出现裂痕:可能是刀有缺口,石蜡内有杂质,组织内有钙化、骨片或有线结, 也可能会有棉纸纤维等。玻片不连片,切不下片,玻片很厚,或者玻片后蜡块发白,内陷:组织脱水不佳。补救办法:可先将蜡块溶解,取出组织,放入加热水浴的**内(80℃),30~60分钟,再进行透明浸蜡包埋玻片,也许会好一点。新乡市维克科教仪器有限公司生产和供应各类生物显微玻片、病理切片等。
病理切片制作时如何进行包埋?中国澳门质量组胚病理切片
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