结合酶分子中则除了 多肽链组成的蛋白质,还有非蛋白成分,如金属离子、铁卟啉或含B族维生素的小分子有机物。结合酶的蛋白质部分称为酶蛋白(apoenzyme),非蛋白质部分统称为辅助因子(cofactor),两者一起组成全酶(holoenzyme);只有全酶才有 催化活性,如果两者分开则酶活力消失。非蛋白质部分如铁卟啉或含B族维生素的化合物若与酶蛋白以共价键相连的称为辅基(prostheticgroup),用透析或超滤等方法不能使它们与酶蛋白分开;反之两者以非共价键相连的称为辅酶(coenzyme),可用上述方法把两者分开。表4-1为以金属离子作结合酶辅助因子的一些例子。表4-2列出含B族维生素的几种辅酶(基)及其参与的反应。核苷酸可被水解产生核苷和磷酸,核苷还可再进一步水解,产生戊糖和含氮碱基(图15-1)。上海核酸合成途径
1957~1965年H.G.霍拉纳等人设计并合成了由1种、2种或 3种脱氧核苷酸组成的重复顺序的脱氧寡核苷酸片段,并以此为模板用DNA聚合酶和RNA聚合酶进一步复制和转录,得到了具有对应的互补顺序的长链人工信使核糖核酸(mRNA),再用这种人工mRNA在无细胞体系中进行蛋白质合成。通过分析这样得到的多肽产物的氨基酸顺序和与模板中核苷酸顺序的对应关系破译了遗传密码,人工合成基因促进了基因工程的发展。如1977年,坂仓等人首先合成了生长***释放抑制因子的基因,并使之在大肠杆菌中实现了表达,得到了在大肠杆菌中原来并不存在的活性肽(十四肽)。济南中试核酸合成厂商组成核酸的元素有c、h、o、n、p等,其组成上有两个特点:一是核酸一般不含元素s。
核酸主要在细胞核内合成,并在细胞核加工修饰!也有一部分核酸在核外合成,比如线粒体dna和rna,但受细胞核控制,其所需要的聚合酶等来自于细胞核dna编码;主要是在细胞核内,也有少量在细胞核外,核酸是遗传物质,在细胞中,遗传物质主要在细胞核内,也有少量在细胞核外,这也就是说明,为什么生出的小孩像母亲多点;DNA复制在细胞的细胞核;RNA的合成(即DNA的转录)也是在细胞核,只不过合成之后RNA会出细胞核,进行下一步(或者进行翻译,或者直接做功能性的RNA发挥作用)
EF-Tu首先与GTP结合,然后再与氨基酰tRNA结合成三元复合物,这样的三元复合物才能进入A位。此时GTP水解成GDP,EF-Tu和GDP与结合在A位上的氨基酰tRNA分离。多肽链合成后的加工修饰1.一级结构的加工修饰:⑴N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除:N端甲酰蛋氨酸是多肽链合成的起始氨基酸,必须在多肽链折迭成一定的空间结构之前被切除。其过程是:①去甲酰化;②去蛋氨酰基。⑵氨基酸的修饰:由专一性的酶催化进行修饰,包括糖基化、羟基化、磷酸化、甲酰化等。 ⑶二硫键的形成:由专一性的氧化酶催化,将-SH氧化为-S-S-。同样是由DNA转录形成,但是也有再处理过程,将tRNA的前体物由酶切除中间和两端的多余片段。
但是在mRNA5’端并未发现能与小亚基18SRNA配对的S-D序列。目前认为通过帽结合后,mRNA在小亚基上向下游移动而进行扫描,可使mRNA上的起始密码AUG在Met-tRNAfmet的反密码位置固定下来,进行翻译起始。肽链的延长、终止和释放多肽链的延长在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位,转肽和移位三个步骤。(1)为密码子所特定的氨基酸tRNA结合到**白体的A位,称为进位。氨基酰tRNA在进位前需要有三种延长因子的作用,即,热不稳定的E(Unstabletemperature,EF)EF-Tu,热稳定的EF(stabletemperatureEF,EF-Ts)以及依赖GTP的转位因子。dna和rna都含有鸟嘌呤(g)、腺嘌呤(a)和胞嘧啶(c);胸腺嘧啶(t)一般而言只存在于dna中。江苏专业核酸合成供应商
它们是dAMP、dGMP、dCMP及dTMP。它们组成中的脱氧核糖并非先生成而后组合到核苷酸分子中去。上海核酸合成途径
结合酶中的金属离子有多方面功能:它们可能是酶活性中心的组成成分,有的可能在稳定酶分子的构象上起作用,有的可能作为桥梁使酶与底物相连接。辅酶与辅基在催化反应中作为氢(H+和e)或某些化学基团的载体,起传递氢或化学基团的作用。体内酶的种类很多,但酶的辅助因子种类并不多,从表4—1中已见到几种酶均用某种相同的金属离子作为辅助因子的例子,同样的情况亦见于辅酶与辅基,如3-磷酸甘油醛脱氢酶和乳酸脱氢酶均以NAD+作为辅酶。酶催化反应的特异性决定于酶蛋白部分,而辅酶与辅基的作用是参与具体的反应过程中氢(H+和e)及一些特殊化学基团的运载。上海核酸合成途径
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