常规垂直过滤与切向流过滤
与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同,在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中,液体切向流过膜表面,流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜,截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面,过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷,使膜表面不会形成凝胶层,从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜,保持了稳定的过滤速度。
常规垂直过滤 (NFF)
液体垂直通过滤膜,易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层,流速急剧下降
切向流过滤 (TFF)
液体切向流过滤膜,在过滤的同时能对膜表面进行冲刷,使膜表面保持干净,保持稳定的过滤速度
上海登宁Millipore滤膜。安徽超滤膜Millipore密理博品牌Millicell®悬挂式细胞培养小室
用于细胞共培养、细胞迁移实验、药物渗透性实验等
• 独特的设计使上下两侧操作都非常方便,减少对细胞的损害和污染,也很适合频繁的**操作
• 全部为 PET 膜材质,有 5 种膜孔径和 3 种膜面积(适合不同多孔板)的产品供选择;其中 1μL 孔径的是透明的,特别推荐用于光学观察
* 另提供站立式和***培养型小室
提供 24 孔或 96 孔板形式(含盖子、膜板、接收板),方便进行中通量及高通量研究。有 PCF 及 PET 两种膜,孔径多样,包括 0.4μm,1μm,3μm,5μm 及 8μm。精心的设计使操作更方便,配合电阻仪使用,进行 Caco2 等高通量实验获得稳定的比较好效果
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样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
除盐或渗滤
除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。 可以在Amicon® Ultra-15装置中,通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式,去除盐分或更换缓冲液。 可重复“洗出”过程,直到污染微溶质的浓度充分降低为止
流速
影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。图1和表1可用来估计达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。 15 mL样本旋转时间一般约需15至40分钟。 尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过,但一般在旋转15至40分钟之后才能达到较低浓缩液体积(100–150 μL)。
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lC Millex 过滤器 专为离子色谱设计的 13 mm 和 25 mm 低溶出物过滤器。 IC Millex 过滤器提供两种孔径和两种直 径。13 mm 过滤器可用于过滤从 1 到 1O mL 的溶液。25 mm 过滤器可用于过 滤 10 到 100 mL 溶液。每批过滤器都通 过测试以确保符合密理博的质量控制标 准。标准包括:泡点、流速、外壳压力、 下游颗粒和 IC 级别。每一个包装盒中 都有完整技术指标的质量证书。低吸附性、低溶出的聚四氟乙烯(PTFE)膜 可用于去除水和温和有机溶液中的微粒,使 IC 色谱更清晰。外壳由低溶出性、高密度的 聚乙烯(HDPE)制造。此外,每个过滤器单 独包装以减少外部颗粒污染的危险。Millipore Millex®针头式过滤器。安徽过滤系统Millipore密理博诚信经营
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温度敏感 温度对速度影响很小 温度对速度影响很小 温度较低时速度明显降低每一种蛋白的制备都是独特的,常常需要摸索和优化。应该考虑为特定蛋白选择相应的工具进行换液和透析。您可以从操作较快 Amicon® Pro 的渗滤法或更温和的 D-Tube™透析法中选择更适合样品的操作方法。这是一种只用一步温和的离心完成渗滤而较大程度保持蛋白活性的好方法。为了与下游应用兼容,常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长,多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活,而且较后还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新,只需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。
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