常规垂直过滤与切向流过滤
与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同，在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中，液体切向流过膜表面，流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜，截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面，过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷，使膜表面不会形成凝胶层，从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜，保持了稳定的过滤速度。
常规垂直过滤 (NFF)
液体垂直通过滤膜，易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层，流速急剧下降
切向流过滤 (TFF)
液体切向流过滤膜，在过滤的同时能对膜表面进行冲刷，使膜表面保持干净，保持稳定的过滤速度
装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。广西疏水性滤膜Millipore密理博材质
Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？
A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案
Q：怀疑浓缩过程中目的蛋白和超滤膜之间可能存在非特异性吸附，如何改善？A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
重庆PTFE滤膜Millipore密理博代理Millipore再生纤维素膜。
Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因有哪些？
A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：
1）a
如果目的样本在滤过液中，那么请排查：
） 是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？
b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。
c）离心机较近是否有校准过？
d）是否尝试这个蛋白？如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的
蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用更小截留分子量的超
滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）a
如果目的样本也不在滤过液中，那么：
）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
Ultrafree®-MC（0.5mL）和Ultrafree®-CL（2mL）是一次性使用的微滤离心管，可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除菌、除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好，是蛋白和核酸样品处理的理想选择。
特点与优点
有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择
采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜
提供无菌包装和非无菌包装形式产品
过滤速度快，数据稳定、重现性好
上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)
配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用
顶盖颜色标识易于区分膜孔径
上海登宁过滤膜安心售后。
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计一经推出即成为生物样品操作的行业参照对象产品。不论是蛋白、核酸、病毒或颗粒物，抑或低浓度样品或宝贵的活性样品，Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化，并满足下游各种应用的要求，使研究者处理样品时倍感轻松。Amicon® Ultra 超滤管的独特优点：有效浓缩同时保证较高的蛋白回收率合理的死体积设计
避免样品离干而降低回收率
•便于估计和控制样品浓缩倍数
•重复性好，便于样品数据相互比较
Millipore Stericup® 过滤杯。纯水机耗材Millipore密理博使用
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通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示，采 用 100k NMWL 滤 膜，大 于 100kDa 的分子截留率>90%，但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜，75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果广西疏水性滤膜Millipore密理博材质
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