超滤(UF)常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响,这种方法主要还是以分子大小为较基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa(MW)的分子,盐和水等小分子会透过,因此在大分子样品处理中得到了广阔应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品明显小于膜孔径,则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径,膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和,没有发生容易导致生物大分子失活的相变,而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作,也常用于核酸样品制备,包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩,回收率达到99%以上。离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。Millipore再生纤维素膜。四川疏水性滤膜Millipore密理博材质
完整解决方案 化学相容性和溶出性 研究人员使用微滤膜去除各种水溶液和 有机溶剂中溶解的气体和颗粒。为了满 足其需要,默克密理博提供了具有广阔 化学相容性的膜。例如,Fluoro-pore ™疏 水性聚四氟乙烯膜可适用于过滤几乎所 有的有机溶剂,包括预湿后的强酸和碱 溶液。与其相比,Durapore® 聚偏氟乙烯 膜可更好地过滤水溶液,具有极低的蛋 白质吸附能力。 默克密理博的膜和过滤器由溶出度低的 聚合物制造,以确保您的过滤器在下游 能良好使用。 吸附作用 默克密理博的 Durapore(PVDF)和 Express (PES)膜经过表面改良,尽量减少吸附, 同时较大限度提高亲水性。用于溶出度 实验、食品和饮料的质量监控、土壤和 水质采样、过滤含有蛋白质添加剂的细 胞培养基。吉林过滤系统Millipore密理博欢迎致电上海登宁咨询Millipore密理博滤膜。
• 在过滤过程中,可进行自动、连续 溶剂和转移过滤。无需倾倒 • 2 L 的接收瓶包括瓶塞和储存用的导 管,避免过滤后溶液的转移,从而 降低了工作量和污染风险 • 圆锥形底 2 L 接收瓶可以储存全部 过滤的溶剂 / 缓冲液 MilliSolve 过滤系统专为在真空过滤液 相色谱(LC)缓冲液和溶剂设计的。 该系统使用 0.45 µm 表面滤膜来去除 可能会缩短色谱柱使用寿命的颗粒。 使用 MillSolve 系统进行真空过滤还会从缓冲液中去除大部分的溶解气体, 从而降低气泡影响 LC 设备的风险。 使用自动和连续过滤,在过滤过程中 无需向漏斗中添加液体。过滤在封闭 式系统中进行—这在过滤危险液体时 很重要。 如果要求开放式漏斗过滤,则可以使 用 300 mL 漏斗替换真空盖
蛋白质截留率和浓缩液回收率
Amicon®超过滤装置滤膜的特征由截留分子量(MWCO)描述,即它们截留超过一定分子量的分子的能力。分子量接近MWCO的溶质可能只有部分被截留。滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。在大多数应用中,分子量是用来评估截留特性的一个方便的参数。为了获得较佳结果,请使用MWCO至少比要浓缩的蛋白质溶质分子量小两倍的滤膜
如何量化回收
使用以下方法计算总回收量、浓缩液回收率%及滤出液回收率%。 本程序可算出浓度较高约20 mg/mL的溶液的回收量近似值。
说明: 适当的化验技术包括吸收分光光度学法、放射免疫检定法、折光率及传导性。
Millipore超滤管如何选择?上海登宁告诉你。
Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。特点与优点:有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜提供无菌包装和非无菌包装形式产品过滤速度快,数据稳定、重现性好上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用顶盖颜色标识易于区分膜孔径Millipore密理博Strat-M皮肤膜。湖北超滤离心管Millipore密理博代理
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通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示,采 用 100k NMWL 滤 膜,大 于 100kDa 的分子截留率>90%,但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜,75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果四川疏水性滤膜Millipore密理博材质
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