Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品，在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
Microcon® DNA Fast Flow 超滤管，专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质，医用级O型圈密封，保证了在洗涤步骤中样品丢失较少。反转回收设计，即使样品量很小也能获得理想的得率，浓缩倍数可以达到20X。 上海Millipore过滤膜。浙江超滤膜Millipore密理博价格
Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因有哪些？
A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：
1）a
如果目的样本在滤过液中，那么请排查：
） 是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？
b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。
c）离心机较近是否有校准过？
d）是否尝试这个蛋白？如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的
蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用更小截留分子量的超
滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）a
如果目的样本也不在滤过液中，那么：
）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
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如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器
1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本（如果使用定角转子则为12 mL）。
2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中，用一个类似的装置抵住。
3. 当使用摆桶转子时，以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。
当使用定角转子时，装置的方向要使滤膜面板朝上，以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。
说明： 关于典型旋转时间，请参见图1和表1。
4. 如要回收浓缩后的溶质，在过滤装置底部插入一个移液管，然后左右摇摆着吸取样本，以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。
说明： 要想达到理想回收，离心后请立即取走浓缩后样本。
微孔滤膜的额定孔径通常以微米值给出， 大于此值的颗粒将被截留。微滤膜孔隙 范围从 0.025 µm（用于核酸和蛋白质的微 透析技术）到0.1-0.22 µm（用于除菌过滤）， 到 0.3-0.45 µm（用于净化或微生物截留）， 到 0.45-8.0 µm（用于空气或流体颗粒监 控）。孔径为 0.22 µm 的过滤器较常用于 除菌过滤，且足以去除细菌。但 如果溶液含动物血清，则需要使用孔径 为 0.1 µm 的过滤器来去除支原体。
膜直径 特殊应用所需的过滤器直径取决于过滤 溶液的体积和流速（流量）。 膜通量和过滤能力 过滤溶液的速度和效率取决于膜的过滤 能力（或通量）。当过滤大量或严重污 染的溶液如粗制细胞裂解物时，膜孔可 达到较大过滤能力，默克密理博 Express® （PES）膜过滤器具有较高过滤能力。其不对称的孔径设计使大颗粒保留在顶 部，不堵塞截留细菌的小孔，从而提高 过滤能力并延长过滤器的使用寿命。 Millipore密理博ZipTip微量层析柱。
温度：通常增加操作时的温度可以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。实践中一般是以样品和设备能耐受的较高温度来操作。pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的pI 值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。
Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品，在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
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默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计一经推出即成为生物样品操作的行业参照对象产品。不论是蛋白、核酸、病毒或颗粒物，抑或低浓度样品或宝贵的活性样品，Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化，并满足下游各种应用的要求，使研究者处理样品时倍感轻松。Amicon® Ultra 超滤管的独特优点：有效浓缩同时保证较高的蛋白回收率合理的死体积设计
避免样品离干而降低回收率
•便于估计和控制样品浓缩倍数
•重复性好，便于样品数据相互比较
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上海登宁科技有限公司致力于仪器仪表，是一家贸易型公司。公司自成立以来，以质量为发展，让匠心弥散在每个细节，公司旗下实验耗材，医疗诊断耗材，科研耗材深受客户的喜爱。公司注重以质量为中心，以服务为理念，秉持诚信为本的理念，打造仪器仪表良好品牌。上海登宁秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念，全力打造公司的重点竞争力。
