如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器
1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本（如果使用定角转子则为12 mL）。
2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中，用一个类似的装置抵住。
3. 当使用摆桶转子时，以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。
当使用定角转子时，装置的方向要使滤膜面板朝上，以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。
说明： 关于典型旋转时间，请参见图1和表1。
4. 如要回收浓缩后的溶质，在过滤装置底部插入一个移液管，然后左右摇摆着吸取样本，以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。
说明： 要想达到理想回收，离心后请立即取走浓缩后样本。
Millipore密理博Stericup®和Steritop®过滤系统。浙江进口Millipore密理博规格
常规垂直过滤与切向流过滤
与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同，在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中，液体切向流过膜表面，流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜，截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面，过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷，使膜表面不会形成凝胶层，从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜，保持了稳定的过滤速度。
常规垂直过滤 (NFF)
液体垂直通过滤膜，易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层，流速急剧下降
切向流过滤 (TFF)
液体切向流过滤膜，在过滤的同时能对膜表面进行冲刷，使膜表面保持干净，保持稳定的过滤速度
浙江超滤杯Millipore密理博一级代理Millipore再生纤维素膜。通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示，采 用 100k NMWL 滤 膜，大 于 100kDa 的分子截留率>90%，但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜，75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果
较大化样品回收率
浓缩液中的样本回收量低可能由于吸附损失、过度浓缩、或者样本穿过滤膜造成。
吸附损失取决于溶质浓度、其疏水性、温度、与过滤装置表面的接触时间、样本成分及pH值。 为较大限度地降低损失，离心后请立即取走浓缩后样本。
如果样本起始浓度高，请监视离心过程，以免使样本过度浓缩。 过度浓缩可导致沉淀和样本损失。
如果样本看起来渗过了滤膜，请选用较低MWCO的Amicon® Ultra-15装置。
以***膜为重点技术，默克密理博为蛋白、核酸、病毒、囊泡等生物样品和微珠（纳米颗粒）的浓缩、脱盐、换液提供多样化操作工具。您可以方便地从以下产品中，根据起始样品体积和特别的要求，选择较适合处理方案。 Millipore纯化超滤管。
Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因有哪些？
A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：
1）a
如果目的样本在滤过液中，那么请排查：
） 是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？
b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。
c）离心机较近是否有校准过？
d）是否尝试这个蛋白？如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的
蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用更小截留分子量的超
滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）a
如果目的样本也不在滤过液中，那么：
）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
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装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。浙江进口Millipore密理博规格
微滤（MF）是使用微孔膜介质（即常见的滤膜），将大小在 0.025μm 到 10.0μm 之间的颗粒物或生物体从溶液中除去。虽然某些非膜材质或深层介质（如厚的玻璃纤维）也能够去除颗粒，但只有滤膜具有精确的孔径才能实现比较准确的截留。在细胞培养实验中，微滤较常被用来做样品的除菌处理（0.1μm 微滤可以去除支原体等）；在核酸和蛋白分析之前，也需要用微滤除去细胞裂解液中的完整细胞和细胞碎片。用于这类分离的膜孔径一般在 0.05μm 到 1.0μ浙江进口Millipore密理博规格
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