微孔滤膜的额定孔径通常以微米值给出, 大于此值的颗粒将被截留。微滤膜孔隙 范围从 0.025 µm(用于核酸和蛋白质的微 透析技术)到0.1-0.22 µm(用于除菌过滤), 到 0.3-0.45 µm(用于净化或微生物截留), 到 0.45-8.0 µm(用于空气或流体颗粒监 控)。孔径为 0.22 µm 的过滤器较常用于 除菌过滤,且足以去除细菌。但 如果溶液含动物血清,则需要使用孔径 为 0.1 µm 的过滤器来去除支原体。
膜直径 特殊应用所需的过滤器直径取决于过滤 溶液的体积和流速(流量)。 膜通量和过滤能力 过滤溶液的速度和效率取决于膜的过滤 能力(或通量)。当过滤大量或严重污 染的溶液如粗制细胞裂解物时,膜孔可 达到较大过滤能力,默克密理博 Express® (PES)膜过滤器具有较高过滤能力。其不对称的孔径设计使大颗粒保留在顶 部,不堵塞截留细菌的小孔,从而提高 过滤能力并延长过滤器的使用寿命。 Millipore密理博Stericup®和Steritop®过滤系统。四川纯水机耗材Millipore密理博厂家
直接称重程序
大多数稀释蛋白的密度与水的密度大致相同 (即1 g/mL)。 利用这一特性,可通过称取浓缩液与滤过液重量并将其单位从克转化成毫升的方法,对其进行量化。 本方法适用于浓度不超过或约为20 mg/mL的溶液。
1. 使用之前,分别称取空的过滤装置、离心管和空的浓缩液收集管的重量。
2. 在过滤装置中加入溶液,然后重新称重。
3. 按说明组装装置和离心机。
4. 用移液管收集浓缩液,然后将其注入到已经预先称重的浓缩液收集管。
5. 从离心管上取下装置,然后称取离心管和浓缩液收集管的重量。
6. 减去空的装置/试管的重量,计算初始材料、滤过液及浓缩液的重量。
7. 化验初始材料、滤出液及浓缩液,以确定溶质浓度。
8. 使用重量/体积数据及所测出的浓度来计算回收量
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超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得较好的效果。滤膜的通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参与影响通量的因素很多,包括:压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,这种因素影响较为明显。如果极化影响明显,通量会达到一个平台,甚至可能随着压力的增加而降低。浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
Fluoropore 表面滤膜 Fluoropore 滤膜由高密度聚乙烯支撑的 PTFE 薄膜构成(FHUP 没有这种支撑)。 Fluoropore 膜具有广阔的化学兼容性。 Mitex 表面滤膜 Mitex 是 一 种 没 有 支 撑 物 的 疏 水 性 PTFE 膜。可用于其它膜不能承受的极 端的化学或温度条件下使用(较高 260℃)。 LCR 表面滤膜 LCR 是一种没有支撑物的亲水性 PTFE 膜,与所有常用的 HPLC 溶剂相容。 不用预先浸润即可过滤水溶液。在针 头式过滤器中使用。Amicon® Ultra-15产品系列有5种不同的截留分子量(截留分子量,MWCO),然而,Amicon® Ultra-15 10K装置(10,000 MWCO)是设计用于体外诊断的装置。它可以用来在分析之前浓缩血清、尿液、脑脊髓液和其他体液。关于其他Amicon® Ultra-15截留分子量.
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Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品,在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
Microcon® DNA Fast Flow 超滤管,专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质,医用级O型圈密封,保证了在洗涤步骤中样品丢失较少。反转回收设计,即使样品量很小也能获得理想的得率,浓缩倍数可以达到20X。 上海登宁过滤膜质量保证。山东混合纤维素滤膜Millipore密理博一级代理
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常规垂直过滤与切向流过滤
与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同,在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中,液体切向流过膜表面,流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜,截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面,过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷,使膜表面不会形成凝胶层,从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜,保持了稳定的过滤速度。
常规垂直过滤 (NFF)
液体垂直通过滤膜,易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层,流速急剧下降
切向流过滤 (TFF)
液体切向流过滤膜,在过滤的同时能对膜表面进行冲刷,使膜表面保持干净,保持稳定的过滤速度
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