Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白,可能的原因有哪些?
A: 首先,Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因:
1)a
如果目的样本在滤过液中,那么请排查:
) 是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?
b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方法请垂询。
c)离心机较近是否有校准过?
d)是否尝试这个蛋白?如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的
蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用更小截留分子量的超
滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)a
如果目的样本也不在滤过液中,那么:
)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
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Fluoropore 表面滤膜 Fluoropore 滤膜由高密度聚乙烯支撑的 PTFE 薄膜构成(FHUP 没有这种支撑)。 Fluoropore 膜具有广阔的化学兼容性。 Mitex 表面滤膜 Mitex 是 一 种 没 有 支 撑 物 的 疏 水 性 PTFE 膜。可用于其它膜不能承受的极 端的化学或温度条件下使用(较高 260℃)。 LCR 表面滤膜 LCR 是一种没有支撑物的亲水性 PTFE 膜,与所有常用的 HPLC 溶剂相容。 不用预先浸润即可过滤水溶液。在针 头式过滤器中使用。Amicon® Ultra-15产品系列有5种不同的截留分子量(截留分子量,MWCO),然而,Amicon® Ultra-15 10K装置(10,000 MWCO)是设计用于体外诊断的装置。它可以用来在分析之前浓缩血清、尿液、脑脊髓液和其他体液。关于其他Amicon® Ultra-15截留分子量.
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用膜来对样品进行处理好处很多,操作简便,效果稳定可靠,成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时,主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等;选择较合适的装置时,还要考虑样品的体积和装置的动力设计,比如真空或加压配套设备等。
深层过滤介质(左)内部结构松散、排列无序,通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜(中)由规则、连续的网状多聚物构成,具有精确的孔径,用来截留细菌、胶体及微小颗粒。
超滤膜(右)通常有两个明显的分层:致密的表层,厚 0.1-1.5μm,孔径 10-400Å;下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格,用于生物大分子样品处理,应用多样。
对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel®再生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附较小,是 Amicon® Ultra超滤管等超滤产品成为首要选择关键之一。滤膜和装置表面对溶质的吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向流系统,支持您获得理想的处理效果。Millipore空气检测滤膜。
Amicon® Ultra-15 10K离心过滤器具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。 其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至40分钟。 竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。 浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。 该装置可在摆桶或定角转子中旋转。 Amicon® Ultra-15 10K装置未经消毒,只供一次使用。上海登宁Millipore滤膜价格。重庆针头滤器Millipore密理博用途
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仪器仪表是用以检出、测量、观察、计算各种物理量、物质成分、物性参数等的器具或设备。真空检漏仪、压力表、测长仪、显微镜、乘法器等均属于仪器仪表。近年来,得益于机械、冶金、石化行业等仪器仪表服务领域经营状况的好转,我国仪器仪表制造业发展一路向好。中国的新型工业化进程,信息化和工业化融合的进一步加深,带动各个工业领域对于实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材等产品的需求。在国民经济运行中,从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,橡塑制品、实验室设备、仪器仪表、机电设备、汽车配件、摩托车配件、通讯设备、家用电器、机械设备、工具量具、电动工具、刀 具、五金交电、电线电缆、音响设备、计算机、软件及辅助设备、体育用品、办公用品、文具用品、安防设备、电子元器件的批发、零售。等设备是提高劳动生产率的倍增器,对国民经济有着巨大的作用和影响力。美国商业部地区技术和标准研究院(NIST)提出的报告称:美国90年代仪器仪表工业产值只占工业总产值的4%,但它对国民经济(GNP)的影响面却达到66%。尽管在我国相关政策的引导和支持下,我国仪器仪表行业得到了飞速发展。但是从销售整体上看,我国的仪器仪表行业还是落后于国际水平的。重点技术缺乏、高精尖产品严重依赖进口、仪器仪表产品同质化严重、生产工艺落后、研发能力弱、精度不高等问题的凸显,为仪器仪表行业的发展带来了严峻的挑战。上海聚碳酸酯滤膜Millipore密理博
上海登宁科技有限公司是一家从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,橡塑制品、实验室设备、仪器仪表、机电设备、汽车配件、摩托车配件、通讯设备、家用电器、机械设备、工具量具、电动工具、刀 具、五金交电、电线电缆、音响设备、计算机、软件及辅助设备、体育用品、办公用品、文具用品、安防设备、电子元器件的批发、零售。的公司,是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。公司自创立以来,投身于实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材,是仪器仪表的主力军。上海登宁始终以本分踏实的精神和必胜的信念,影响并带动团队取得成功。上海登宁始终关注自身,在风云变化的时代,对自身的建设毫不懈怠,高度的专注与执着使上海登宁在行业的从容而自信。