山东聚碳酸酯滤膜Millipore密理博规格

Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因有哪些？

A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：

1）a

如果目的样本在滤过液中，那么请排查：

） 是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？

b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。

c）离心机较近是否有校准过？

d）是否尝试这个蛋白？如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的

蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用更小截留分子量的超

滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。

2）a

如果目的样本也不在滤过液中，那么：

）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？

c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。

装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。山东聚碳酸酯滤膜Millipore密理博规格

Millicell®悬挂式细胞培养小室

用于细胞共培养、细胞迁移实验、药物渗透性实验等

• 独特的设计使上下两侧操作都非常方便，减少对细胞的损害和污染，也很适合频繁的**操作

• 全部为 PET 膜材质，有 5 种膜孔径和 3 种膜面积（适合不同多孔板）的产品供选择；其中 1μL 孔径的是透明的，特别推荐用于光学观察

* 另提供站立式和***培养型小室

提供 24 孔或 96 孔板形式（含盖子、膜板、接收板），方便进行中通量及高通量研究。有 PCF 及 PET 两种膜，孔径多样，包括 0.4μm,1μm,3μm,5μm 及 8μm。精心的设计使操作更方便，配合电阻仪使用，进行 Caco2 等高通量实验获得稳定的比较好效果

北京聚四氟乙烯滤膜Millipore密理博规格Millipore密理博Strat-M皮肤膜。

Ultrafree®-MC（0.5mL）和Ultrafree®-CL（2mL）是一次性使用的微滤离心管，可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好，是蛋白和核酸样品处理的理想选择。特点与优点：有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜提供无菌包装和非无菌包装形式产品过滤速度快，数据稳定、重现性好上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用顶盖颜色标识易于区分膜孔径

超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH或离子强度改变的情况下倾向于聚集或改变构象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大很多，从而导致排阻增加。比如，有些蛋白质在某些缓冲液条件下会发生多聚化，而另一些则发生解聚（如血红素蛋白）成亚基。这使选择合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验，我们通常推荐选择为目的分子大小一半的膜作为尝试的起点，再根据实际情况加以调整。Millipore Millex®针头式过滤器。

切向流过滤技术

切向流超滤技术是目前普遍采用的一种膜分离技术，属于分子量水平的切向流过滤，通常截流分子量范围：1-1000 kD。超滤 (Ultrafiltration, UF) 是对溶液中的极小颗粒及可溶性分子进行分离的方法。这种分离主要基于分子的大小，但滤膜介质的通透性也会受样品的化学、分子及电荷特性的影响。超滤通常只能分离那些大小相差 3-5 倍以上的分子，而不适合分离大小相似的分子。

应用范围：

澄清 , 如：分离细胞 / 细胞碎片 ( 细胞收集细胞去除 )

浓缩 , 如：蛋白浓缩，去除水 / 缓冲溶液

脱盐

缓冲溶液的置换 , 如：层析前后缓冲液体系的改变

除热原 , 如：中药注射剂的热原去除

分离 / 纯化 , 如：蛋白、多肽、多糖、病毒、内病毒颗粒、

核酸、抗体

Millipore密理博搅拌式超滤杯。山东聚碳酸酯滤膜Millipore密理博规格

常规垂直过滤与切向流过滤

与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同，在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中，液体切向流过膜表面，流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜，截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面，过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷，使膜表面不会形成凝胶层，从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜，保持了稳定的过滤速度。

常规垂直过滤 (NFF)

液体垂直通过滤膜，易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层，流速急剧下降

切向流过滤 (TFF)

液体切向流过滤膜，在过滤的同时能对膜表面进行冲刷，使膜表面保持干净，保持稳定的过滤速度

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