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除盐或渗滤

除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。 可以在Amicon® Ultra-15装置中，通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式，去除盐分或更换缓冲液。 可重复“洗出”过程，直到污染微溶质的浓度充分降低为止

流速

影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。图1和表1可用来估计达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。 15 mL样本旋转时间一般约需15至40分钟。 尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过，但一般在旋转15至40分钟之后才能达到较低浓缩液体积（100–150 μL）。

Millipore密理博8300型超滤杯。北京滤膜Millipore密理博诚信经营

三种材质的膜可供选择 采 用 默 克 密 理 博 Express PLUS（PES） 膜 的 Millex 过滤器具有较快的流速，双倍于 25 mm 标准针头式过滤器的通量。Durapore 膜在所 有膜中的蛋白吸附较低，推荐用于过滤含有 蛋白质的溶液。尼龙材质具有广阔的化学相 容性，可以用于水溶液和有机溶液的一般性 过滤。 低溶出性 外壳材料和膜的溶出物很低，不会干扰分析 产品。 自动生产过程 33 mm Millex 过滤器的生产过程从膜切割到包 装都是通过流水线装置完全自动进行的以使 污染的风险较小化。四川亲水性滤膜Millipore密理博诚信经营密理博再生纤维素复合膜。

如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器

1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本（如果使用定角转子则为12 mL）。

2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中，用一个类似的装置抵住。

3. 当使用摆桶转子时，以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。

当使用定角转子时，装置的方向要使滤膜面板朝上，以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。

说明： 关于典型旋转时间，请参见图1和表1。

4. 如要回收浓缩后的溶质，在过滤装置底部插入一个移液管，然后左右摇摆着吸取样本，以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。

说明： 要想达到理想回收，离心后请立即取走浓缩后样本。

微孔滤膜的额定孔径通常以微米值给出， 大于此值的颗粒将被截留。微滤膜孔隙 范围从 0.025 µm（用于核酸和蛋白质的微 透析技术）到0.1-0.22 µm（用于除菌过滤）， 到 0.3-0.45 µm（用于净化或微生物截留）， 到 0.45-8.0 µm（用于空气或流体颗粒监 控）。孔径为 0.22 µm 的过滤器较常用于 除菌过滤，且足以去除细菌。但 如果溶液含动物血清，则需要使用孔径 为 0.1 µm 的过滤器来去除支原体。

膜直径 特殊应用所需的过滤器直径取决于过滤 溶液的体积和流速（流量）。 膜通量和过滤能力 过滤溶液的速度和效率取决于膜的过滤 能力（或通量）。当过滤大量或严重污 染的溶液如粗制细胞裂解物时，膜孔可 达到较大过滤能力，默克密理博 Express® （PES）膜过滤器具有较高过滤能力。其不对称的孔径设计使大颗粒保留在顶 部，不堵塞截留细菌的小孔，从而提高 过滤能力并延长过滤器的使用寿命。 Millipore密理博全国代理。

外泌小体（Exosome）是一种囊泡结构，直径通常在30-150nm，常见于正常体液和病理样本，培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体，其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流，影响和调控着多方面的生理功能，包括免疫促进、凋亡调控、血管生成、炎症反应及发育和分化等。由于在体液中出现，外泌小体对于临床生物标志物检测特别有利，成为体外诊断、biomarker研究的新热点。近年来随着分离纯化技术的提高，关于外泌小体的研究成果颇丰；这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索，已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求，以及起始样品的规模、数量，可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒，对操作人员也没有特别的经验要求，超滤法后来居上，成为实验室中制备外泌体的通用方法。Millipore Millex®针头式过滤器。湖北盒式超滤膜包Millipore密理博规格

装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。北京滤膜Millipore密理博诚信经营

Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？

A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案

A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。

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上海登宁科技有限公司致力于仪器仪表，以科技创新实现***管理的追求。上海登宁作为从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让，橡塑制品、实验室设备、仪器仪表、机电设备、汽车配件、摩托车配件、通讯设备、家用电器、机械设备、工具量具、电动工具、刀 具、五金交电、电线电缆、音响设备、计算机、软件及辅助设备、体育用品、办公用品、文具用品、安防设备、电子元器件的批发、零售。的企业之一，为客户提供良好的实验耗材，医疗诊断耗材，科研耗材。上海登宁继续坚定不移地走高质量发展道路，既要实现基本面稳定增长，又要聚焦关键领域，实现转型再突破。上海登宁始终关注仪器仪表市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。