外泌小体（Exosome）是一种囊泡结构，直径通常在30-150nm，常见于正常体液和病理样本，培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体，其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流，影响和调控着多方面的生理功能，包括免疫促进、凋亡调控、血管生成、炎症反应及发育和分化等。由于在体液中出现，外泌小体对于临床生物标志物检测特别有利，成为体外诊断、biomarker研究的新热点。近年来随着分离纯化技术的提高，关于外泌小体的研究成果颇丰；这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索，已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求，以及起始样品的规模、数量，可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒，对操作人员也没有特别的经验要求，超滤法后来居上，成为实验室中制备外泌体的通用方法。上海登宁Millipore滤膜价格。重庆滤膜Millipore密理博厂家
Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？
A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案
Q：怀疑浓缩过程中目的蛋白和超滤膜之间可能存在非特异性吸附，如何改善？A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
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三种材质的膜可供选择 采 用 默 克 密 理 博 Express PLUS（PES） 膜 的 Millex 过滤器具有较快的流速，双倍于 25 mm 标准针头式过滤器的通量。Durapore 膜在所 有膜中的蛋白吸附较低，推荐用于过滤含有 蛋白质的溶液。尼龙材质具有广阔的化学相 容性，可以用于水溶液和有机溶液的一般性 过滤。 低溶出性 外壳材料和膜的溶出物很低，不会干扰分析 产品。 自动生产过程 33 mm Millex 过滤器的生产过程从膜切割到包 装都是通过流水线装置完全自动进行的以使 污染的风险较小化。
除盐或渗滤
除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。 可以在Amicon® Ultra-15装置中，通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式，去除盐分或更换缓冲液。 可重复“洗出”过程，直到污染微溶质的浓度充分降低为止
流速
影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。图1和表1可用来估计达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。 15 mL样本旋转时间一般约需15至40分钟。 尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过，但一般在旋转15至40分钟之后才能达到较低浓缩液体积（100–150 μL）。
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用膜来对样品进行处理好处很多，操作简便，效果稳定可靠，成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时，主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等；选择较合适的装置时，还要考虑样品的体积和装置的动力设计，比如真空或加压配套设备等。
深层过滤介质（左）内部结构松散、排列无序，通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜（中）由规则、连续的网状多聚物构成，具有精确的孔径，用来截留细菌、胶体及微小颗粒。
超滤膜（右）通常有两个明显的分层：致密的表层，厚 0.1-1.5μm，孔径 10-400Å；下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格，用于生物大分子样品处理，应用多样。
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非连续渗滤是换液的一种操作方法，即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积，并多次重复这个操作，直到溶液中的盐或溶剂被去除或降到需要的浓度。而连续渗滤（保持恒定体积）是将超滤杯经转换装置（目录号6003）与补液杯（目录号6028）连接，使供气压和液体流转。连接有转换装置时，不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换，将两种操作模式的优点集中在一起，有利于敏感的（蛋白）样品在较恒定、温和的条件下高效换液。重庆滤膜Millipore密理博厂家
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