应用真空过滤水溶液、有机溶液或腐蚀液 体,进行颗粒污染分析。同时建议 对 HPLC 溶 剂 进 行 过 滤。 请 与 Merck Millipore 联系了解过滤有机溶液时可 使用的滤膜。 与液体接触的硼硅酸盐玻璃部件,其表面用磨砂玻璃密封。整合的底座和 盖与真空的连接处在滤液出口的上 方,可避免滤液吸入真空管。 禁止该换膜过滤器与可燃液体一起使 用。
应用: 浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株DNA/RNA样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本, 净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在HPLC之前去除蛋白质,除盐、更换缓冲液或渗滤
所提供的材料:Amicon® Ultra-15 10K装置包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管。
上海登宁Millipore密理博离心管。疏水性滤膜Millipore密理博厂家Centriprep®超滤管是一次性使用的离心管,可以用于2-15mL生物样品的纯化、浓缩、脱盐等过滤应用。这种离心超滤管流速很快,设计紧凑,螺旋盖使用起来非常方便,过滤收集管内置低吸附的Ultracel®再生纤维素膜,装有气密盖。优点与应用特有的反向流操作模式,较大的死体积,采用Ultracel®膜,用于浓缩和纯化富含颗粒物,的高浓度样品,样品回收率>90%,配合标准的50mL离心管吊篮式转子使用,从发酵培养基、细胞培养基、细胞裂解液中分,离低分子量溶质天津滤膜Millipore密理博代理Millipore密理博切向流过滤装置。
Q:A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理?
A:提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的,同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在,大 小 在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案
Q:怀疑浓缩过程中目的蛋白和超滤膜之间可能存在非特异性吸附,如何改善?A:Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理,。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
除盐或渗滤
除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。 可以在Amicon® Ultra-15装置中,通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式,去除盐分或更换缓冲液。 可重复“洗出”过程,直到污染微溶质的浓度充分降低为止
流速
影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。图1和表1可用来估计达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。 15 mL样本旋转时间一般约需15至40分钟。 尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过,但一般在旋转15至40分钟之后才能达到较低浓缩液体积(100–150 μL)。
Millipore超滤管如何选择?上海登宁告诉你。
蛋白质截留率和浓缩液回收率
Amicon®超过滤装置滤膜的特征由截留分子量(MWCO)描述,即它们截留超过一定分子量的分子的能力。分子量接近MWCO的溶质可能只有部分被截留。滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。在大多数应用中,分子量是用来评估截留特性的一个方便的参数。为了获得较佳结果,请使用MWCO至少比要浓缩的蛋白质溶质分子量小两倍的滤膜
如何量化回收
使用以下方法计算总回收量、浓缩液回收率%及滤出液回收率%。 本程序可算出浓度较高约20 mg/mL的溶液的回收量近似值。
说明: 适当的化验技术包括吸收分光光度学法、放射免疫检定法、折光率及传导性。
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完整解决方案 化学相容性和溶出性 研究人员使用微滤膜去除各种水溶液和 有机溶剂中溶解的气体和颗粒。为了满 足其需要,默克密理博提供了具有广阔 化学相容性的膜。例如,Fluoro-pore ™疏 水性聚四氟乙烯膜可适用于过滤几乎所 有的有机溶剂,包括预湿后的强酸和碱 溶液。与其相比,Durapore® 聚偏氟乙烯 膜可更好地过滤水溶液,具有极低的蛋 白质吸附能力。 默克密理博的膜和过滤器由溶出度低的 聚合物制造,以确保您的过滤器在下游 能良好使用。 吸附作用 默克密理博的 Durapore(PVDF)和 Express (PES)膜经过表面改良,尽量减少吸附, 同时较大限度提高亲水性。用于溶出度 实验、食品和饮料的质量监控、土壤和 水质采样、过滤含有蛋白质添加剂的细 胞培养基。疏水性滤膜Millipore密理博厂家
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