蛋白质截留率和浓缩液回收率
Amicon®超过滤装置滤膜的特征由截留分子量(MWCO)描述,即它们截留超过一定分子量的分子的能力。分子量接近MWCO的溶质可能只有部分被截留。滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。在大多数应用中,分子量是用来评估截留特性的一个方便的参数。为了获得较佳结果,请使用MWCO至少比要浓缩的蛋白质溶质分子量小两倍的滤膜
如何量化回收
使用以下方法计算总回收量、浓缩液回收率%及滤出液回收率%。 本程序可算出浓度较高约20 mg/mL的溶液的回收量近似值。
说明: 适当的化验技术包括吸收分光光度学法、放射免疫检定法、折光率及传导性。
Millipore TS2预处理柱。江苏PC滤膜Millipore密理博材质
Q:A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理?
A:提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的,同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在,大 小 在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案
Q:怀疑浓缩过程中目的蛋白和超滤膜之间可能存在非特异性吸附,如何改善?A:Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理,。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
湖南疏水性滤膜Millipore密理博使用Millipore Millex®针头式过滤器。
Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品,在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
Microcon® DNA Fast Flow 超滤管,专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质,医用级O型圈密封,保证了在洗涤步骤中样品丢失较少。反转回收设计,即使样品量很小也能获得理想的得率,浓缩倍数可以达到20X。
Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除菌、除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。
特点与优点
有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择
采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜
提供无菌包装和非无菌包装形式产品
过滤速度快,数据稳定、重现性好
上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)
配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用
顶盖颜色标识易于区分膜孔径
上海登宁Millipore密理博超滤管。
超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得较好的效果。滤膜的通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参与影响通量的因素很多,包括:压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,这种因素影响较为明显。如果极化影响明显,通量会达到一个平台,甚至可能随着压力的增加而降低。浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 上海登宁过滤膜安心售后。湖南PC滤膜Millipore密理博规格
上海Millipore过滤膜的特点分析。江苏PC滤膜Millipore密理博材质
常规垂直过滤与切向流过滤
与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同,在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中,液体切向流过膜表面,流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜,截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面,过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷,使膜表面不会形成凝胶层,从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜,保持了稳定的过滤速度。
常规垂直过滤 (NFF)
液体垂直通过滤膜,易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层,流速急剧下降
切向流过滤 (TFF)
液体切向流过滤膜,在过滤的同时能对膜表面进行冲刷,使膜表面保持干净,保持稳定的过滤速度
江苏PC滤膜Millipore密理博材质上海登宁科技有限公司总部位于上海外高桥保税区美桂北路378号,是一家从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,橡塑制品、实验室设备、仪器仪表、机电设备、汽车配件、摩托车配件、通讯设备、家用电器、机械设备、工具量具、电动工具、刀 具、五金交电、电线电缆、音响设备、计算机、软件及辅助设备、体育用品、办公用品、文具用品、安防设备、电子元器件的批发、零售。的公司。上海登宁深耕行业多年,始终以客户的需求为向导,为客户提供***的实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材。上海登宁不断开拓创新,追求出色,以技术为先导,以产品为平台,以应用为重点,以服务为保证,不断为客户创造更高价值,提供更优服务。上海登宁始终关注仪器仪表市场,以敏锐的市场洞察力,实现与客户的成长共赢。