通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示，采 用 100k NMWL 滤 膜，大 于 100kDa 的分子截留率>90%，但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜，75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果Millipore密理博8300型超滤杯。北京Millipore密理博使用
微孔滤膜的额定孔径通常以微米值给出， 大于此值的颗粒将被截留。微滤膜孔隙 范围从 0.025 µm（用于核酸和蛋白质的微 透析技术）到0.1-0.22 µm（用于除菌过滤）， 到 0.3-0.45 µm（用于净化或微生物截留）， 到 0.45-8.0 µm（用于空气或流体颗粒监 控）。孔径为 0.22 µm 的过滤器较常用于 除菌过滤，且足以去除细菌。但 如果溶液含动物血清，则需要使用孔径 为 0.1 µm 的过滤器来去除支原体。
膜直径 特殊应用所需的过滤器直径取决于过滤 溶液的体积和流速（流量）。 膜通量和过滤能力 过滤溶液的速度和效率取决于膜的过滤 能力（或通量）。当过滤大量或严重污 染的溶液如粗制细胞裂解物时，膜孔可 达到较大过滤能力，默克密理博 Express® （PES）膜过滤器具有较高过滤能力。其不对称的孔径设计使大颗粒保留在顶 部，不堵塞截留细菌的小孔，从而提高 过滤能力并延长过滤器的使用寿命。 广西Millipore密理博厂家上海Millipore过滤膜。
常规溶液过滤（NFF）: 液体在压力或真空驱动下直接流过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上，小分子则通过膜流出。NFF 常用于无菌过滤、澄清预过滤及病毒 / 蛋白样品制备等。切向流过滤（TFF）: 液体流过时与膜表面呈一定角度，被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表面，而且还会被切向流从膜表面扫除，因此 TFF 成为按分子大小不同分离的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法，而现在，TFF 技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中，使小体积样品的浓缩和分离操作也变得更加方便。
较大化样品回收率
浓缩液中的样本回收量低可能由于吸附损失、过度浓缩、或者样本穿过滤膜造成。
吸附损失取决于溶质浓度、其疏水性、温度、与过滤装置表面的接触时间、样本成分及pH值。 为较大限度地降低损失，离心后请立即取走浓缩后样本。
如果样本起始浓度高，请监视离心过程，以免使样本过度浓缩。 过度浓缩可导致沉淀和样本损失。
如果样本看起来渗过了滤膜，请选用较低MWCO的Amicon® Ultra-15装置。
以***膜为重点技术，默克密理博为蛋白、核酸、病毒、囊泡等生物样品和微珠（纳米颗粒）的浓缩、脱盐、换液提供多样化操作工具。您可以方便地从以下产品中，根据起始样品体积和特别的要求，选择较适合处理方案。 Millipore Millex®针头式过滤器。
蛋白质截留率和浓缩液回收率
Amicon®超过滤装置滤膜的特征由截留分子量（MWCO）描述，即它们截留超过一定分子量的分子的能力。分子量接近MWCO的溶质可能只有部分被截留。滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。在大多数应用中，分子量是用来评估截留特性的一个方便的参数。为了获得较佳结果，请使用MWCO至少比要浓缩的蛋白质溶质分子量小两倍的滤膜
如何量化回收
使用以下方法计算总回收量、浓缩液回收率%及滤出液回收率%。 本程序可算出浓度较高约20 mg/mL的溶液的回收量近似值。
说明： 适当的化验技术包括吸收分光光度学法、放射免疫检定法、折光率及传导性。
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Millipore纯化超滤管。北京Millipore密理博使用
Amicon® Ultra-15 10K离心过滤器具有快速超过滤功能，能够达到较高的浓缩系数，易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。 其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率（通常大于90%稀薄的初始溶液），并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至40分钟。 竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低，过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。 浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集，而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。 该装置可在摆桶或定角转子中旋转。 Amicon® Ultra-15 10K装置未经消毒，只供一次使用。北京Millipore密理博使用
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