广西超滤膜Millipore密理博使用

用膜来对样品进行处理好处很多，操作简便，效果稳定可靠，成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时，主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等；选择较合适的装置时，还要考虑样品的体积和装置的动力设计，比如真空或加压配套设备等。

深层过滤介质（左）内部结构松散、排列无序，通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜（中）由规则、连续的网状多聚物构成，具有精确的孔径，用来截留细菌、胶体及微小颗粒。

超滤膜（右）通常有两个明显的分层：致密的表层，厚 0.1-1.5μm，孔径 10-400Å；下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格，用于生物大分子样品处理，应用多样。

Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？

A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案

A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。

北京聚碳酸酯滤膜Millipore密理博代理装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。

Pellicon® 3 Ultracel® 盒式超滤膜包

Pellicon® 3 Ultracel® 盒式超滤膜包是先进的高性能超滤膜包。其独特的聚丙烯外壳，热熔合构造，以及其装有的无缺陷型 Ultracel® PLC 再生纤维素复合膜，使其能够耐受更高的操作压力、温度、有机溶剂和更苛刻的清洗条件。

Pellicon® 3 膜包将硬聚丙烯外壳和膜端帽整合，这样的结构可保护超滤膜，使超滤膜免受碰撞和其它潜在损坏的影响。同时将垫圈整合进膜包端帽，因此安装时不需要使用额外的膜包间垫片。

Pellicon® 3 膜包独特的结构设计及全自动制造工艺提供了****的表现一致性和不同型号膜包间更精细的线性放大能力。

Pellicon® 3 Ultracel® 超滤膜包是处理胰岛素，多肽，小分子制剂，单抗，生物仿制药，血液制品等的理想超滤装置。

切向流过滤技术

切向流超滤技术是目前普遍采用的一种膜分离技术，属于分子量水平的切向流过滤，通常截流分子量范围：1-1000 kD。超滤 (Ultrafiltration, UF) 是对溶液中的极小颗粒及可溶性分子进行分离的方法。这种分离主要基于分子的大小，但滤膜介质的通透性也会受样品的化学、分子及电荷特性的影响。超滤通常只能分离那些大小相差 3-5 倍以上的分子，而不适合分离大小相似的分子。

应用范围：

澄清 , 如：分离细胞 / 细胞碎片 ( 细胞收集细胞去除 )

浓缩 , 如：蛋白浓缩，去除水 / 缓冲溶液

脱盐

缓冲溶液的置换 , 如：层析前后缓冲液体系的改变

除热原 , 如：中药注射剂的热原去除

分离 / 纯化 , 如：蛋白、多肽、多糖、病毒、内病毒颗粒、

核酸、抗体

Stericup®和Steritop®过滤系统

Stericup®过滤杯和Steritop®瓶顶式过滤器是**值得信赖的细胞培养基、缓冲液及试剂的无菌过滤工具。Stericup®过滤杯由一个过滤漏斗及一个带盖的接收瓶组合而成，便于过滤和储存，回收率非常高。Steritop®瓶顶式过滤器可与瓶口直径为33mm或45mm的接收瓶配套使用。

更大的膜面积，圆形膜面无死角，过滤更快速，样品残留损失更少Millipore 专有的 PVDF 膜和改良 Express PLUS PES 膜，满足低蛋白吸附和快速过滤的高要求贴心的人体工程学设计，操作时更稳定，整体体验更优越PES 膜系列经过干细胞培养验证，满足细胞培养对培养基 / 缓冲液**严格的要求 上海Millipore过滤膜的特点分析。天津聚四氟乙烯滤膜Millipore密理博厂家

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Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因有哪些？

A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：

1）a

如果目的样本在滤过液中，那么请排查：

） 是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？

b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。

c）离心机较近是否有校准过？

d）是否尝试这个蛋白？如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的

蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用更小截留分子量的超

滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。

2）a

如果目的样本也不在滤过液中，那么：

）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？

c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。

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