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切向流过滤技术

切向流超滤技术是目前普遍采用的一种膜分离技术，属于分子量水平的切向流过滤，通常截流分子量范围：1-1000 kD。超滤 (Ultrafiltration, UF) 是对溶液中的极小颗粒及可溶性分子进行分离的方法。这种分离主要基于分子的大小，但滤膜介质的通透性也会受样品的化学、分子及电荷特性的影响。超滤通常只能分离那些大小相差 3-5 倍以上的分子，而不适合分离大小相似的分子。

应用范围：

澄清 , 如：分离细胞 / 细胞碎片 ( 细胞收集细胞去除 )

浓缩 , 如：蛋白浓缩，去除水 / 缓冲溶液

脱盐

缓冲溶液的置换 , 如：层析前后缓冲液体系的改变

除热原 , 如：中药注射剂的热原去除

分离 / 纯化 , 如：蛋白、多肽、多糖、病毒、内病毒颗粒、

核酸、抗体

常规垂直过滤与切向流过滤

与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同，在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中，液体切向流过膜表面，流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜，截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面，过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷，使膜表面不会形成凝胶层，从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜，保持了稳定的过滤速度。

常规垂直过滤 (NFF)

液体垂直通过滤膜，易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层，流速急剧下降

切向流过滤 (TFF)

液体切向流过滤膜，在过滤的同时能对膜表面进行冲刷，使膜表面保持干净，保持稳定的过滤速度

预过滤 另一种延长过滤器寿命和过滤通量的方 法是在上方添加预过滤膜。有机溶剂通 常使用聚丙烯过滤器进行预过滤，孔径 在 0.6-30 µm 之间。这些聚丙烯过滤器先 用酒精湿润后，还可以用于水溶液中。 水溶液通常使用含有粘合树脂的玻璃纤 维预过滤膜净化，该预过滤膜具有较高 的湿强度，并能从严重污染的液体中提 取污染物。如果您担心玻璃纤维脱落可 使用密理博的 RW 型预过滤器，其使用的 是防脱落材料（形成围绕成聚脂网络的 纤维素酯的聚合物）。RW 型预过滤膜与 玻璃纤维过滤膜具有相同的纳污能力。

蛋白质截留率和浓缩液回收率

Amicon®超过滤装置滤膜的特征由截留分子量（MWCO）描述，即它们截留超过一定分子量的分子的能力。分子量接近MWCO的溶质可能只有部分被截留。滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。在大多数应用中，分子量是用来评估截留特性的一个方便的参数。为了获得较佳结果，请使用MWCO至少比要浓缩的蛋白质溶质分子量小两倍的滤膜

如何量化回收

使用以下方法计算总回收量、浓缩液回收率%及滤出液回收率%。 本程序可算出浓度较高约20 mg/mL的溶液的回收量近似值。

说明： 适当的化验技术包括吸收分光光度学法、放射免疫检定法、折光率及传导性。

Millipore空气检测滤膜。

默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计一经推出即成为生物样品操作的行业参照对象产品。不论是蛋白、核酸、病毒或颗粒物，抑或低浓度样品或宝贵的活性样品，Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化，并满足下游各种应用的要求，使研究者处理样品时倍感轻松。Amicon® Ultra 超滤管的独特优点：有效浓缩同时保证较高的蛋白回收率合理的死体积设计

避免样品离干而降低回收率

•便于估计和控制样品浓缩倍数

•重复性好，便于样品数据相互比较

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用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同，样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计，加快处理速度；反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法，是非常方便的工具。

Microcon®为横膜式超滤管，没有死体积，用于大分子样品的浓缩、脱盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分离，比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。这种小管适合在1.5mL离心机中使用，其Ultracel®超滤膜对于蛋白及其它成分都表现出极低的非特异性结合，连同医药级O型圈封闭设计，确保更少的样品丢失，更稳定的数据结果。诸多考虑周到的精细设计使Microcon®成为较好用的样品制备工具之一。 山东超滤离心管Millipore密理博欢迎选购

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