对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel®再生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附较小，是 Amicon® Ultra超滤管等超滤产品成为首要选择关键之一。滤膜和装置表面对溶质的吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向流系统，支持您获得理想的处理效果。Millipore空气检测滤膜。上海亲水性滤膜Millipore密理博欢迎选购
直接称重程序
大多数稀释蛋白的密度与水的密度大致相同 (即1 g/mL)。 利用这一特性，可通过称取浓缩液与滤过液重量并将其单位从克转化成毫升的方法，对其进行量化。 本方法适用于浓度不超过或约为20 mg/mL的溶液。
1. 使用之前，分别称取空的过滤装置、离心管和空的浓缩液收集管的重量。
2. 在过滤装置中加入溶液，然后重新称重。
3. 按说明组装装置和离心机。
4. 用移液管收集浓缩液，然后将其注入到已经预先称重的浓缩液收集管。
5. 从离心管上取下装置，然后称取离心管和浓缩液收集管的重量。
6. 减去空的装置/试管的重量，计算初始材料、滤过液及浓缩液的重量。
7. 化验初始材料、滤出液及浓缩液，以确定溶质浓度。
8. 使用重量/体积数据及所测出的浓度来计算回收量
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Amicon® Ultra-15 10K离心过滤器具有快速超过滤功能，能够达到较高的浓缩系数，易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。 其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率（通常大于90%稀薄的初始溶液），并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至40分钟。 竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低，过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。 浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集，而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。 该装置可在摆桶或定角转子中旋转。 Amicon® Ultra-15 10K装置未经消毒，只供一次使用。
如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器
1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本（如果使用定角转子则为12 mL）。
2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中，用一个类似的装置抵住。
3. 当使用摆桶转子时，以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。
当使用定角转子时，装置的方向要使滤膜面板朝上，以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。
说明： 关于典型旋转时间，请参见图1和表1。
4. 如要回收浓缩后的溶质，在过滤装置底部插入一个移液管，然后左右摇摆着吸取样本，以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。
说明： 要想达到理想回收，离心后请立即取走浓缩后样本。
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Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？
A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案
Q：怀疑浓缩过程中目的蛋白和超滤膜之间可能存在非特异性吸附，如何改善？A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
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Pellicon® 3 Ultracel® 盒式超滤膜包是先进的高性能超滤膜包。其独特的聚丙烯外壳，热熔合构造，以及其装有的无缺陷型 Ultracel® PLC 再生纤维素复合膜，使其能够耐受更高的操作压力、温度、有机溶剂和更苛刻的清洗条件。
Pellicon® 3 膜包将硬聚丙烯外壳和膜端帽整合，这样的结构可保护超滤膜，使超滤膜免受碰撞和其它潜在损坏的影响。同时将垫圈整合进膜包端帽，因此安装时不需要使用额外的膜包间垫片。
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