通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示,采 用 100k NMWL 滤 膜,大 于 100kDa 的分子截留率>90%,但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜,75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果Millipore密理博ZipTip微量层析柱。上海Millipore密理博批发
如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器
1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本(如果使用定角转子则为12 mL)。
2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中,用一个类似的装置抵住。
3. 当使用摆桶转子时,以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。
当使用定角转子时,装置的方向要使滤膜面板朝上,以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。
说明: 关于典型旋转时间,请参见图1和表1。
4. 如要回收浓缩后的溶质,在过滤装置底部插入一个移液管,然后左右摇摆着吸取样本,以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。
说明: 要想达到理想回收,离心后请立即取走浓缩后样本。
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常规垂直过滤与切向流过滤
与常规垂直过滤 (Normal Flow Filtration,NFF) 不同,在切向流过滤 (Tangential Flow Filtration,TFF) 中,液体切向流过膜表面,流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜,截留部分则在系统中循环回流。整个过程中液体以一定速度连续流过滤膜表面,过滤的同时也对滤膜表面进行了冲刷,使膜表面不会形成凝胶层,从而使料液中的颗粒不会很快堵塞滤膜,保持了稳定的过滤速度。
常规垂直过滤 (NFF)
液体垂直通过滤膜,易造成膜表面形成高浓度凝胶和颗粒层,流速急剧下降
切向流过滤 (TFF)
液体切向流过滤膜,在过滤的同时能对膜表面进行冲刷,使膜表面保持干净,保持稳定的过滤速度
• 在过滤过程中,可进行自动、连续 溶剂和转移过滤。无需倾倒 • 2 L 的接收瓶包括瓶塞和储存用的导 管,避免过滤后溶液的转移,从而 降低了工作量和污染风险 • 圆锥形底 2 L 接收瓶可以储存全部 过滤的溶剂 / 缓冲液 MilliSolve 过滤系统专为在真空过滤液 相色谱(LC)缓冲液和溶剂设计的。 该系统使用 0.45 µm 表面滤膜来去除 可能会缩短色谱柱使用寿命的颗粒。 使用 MillSolve 系统进行真空过滤还会从缓冲液中去除大部分的溶解气体, 从而降低气泡影响 LC 设备的风险。 使用自动和连续过滤,在过滤过程中 无需向漏斗中添加液体。过滤在封闭 式系统中进行—这在过滤危险液体时 很重要。 如果要求开放式漏斗过滤,则可以使 用 300 mL 漏斗替换真空盖Amicon® Ultra超滤管。
Pellicon® 3 Biomax® 盒式超滤膜包
Pellicon®3 Biomax® 盒式超滤膜包是先进的高性能超滤膜包,装有无缺陷型 Biomax® 改良聚醚砜复合膜,具有独特的聚丙烯外壳,热熔合构造。是用于单克隆抗体、白蛋白、***、疫苗和生长因子等产品的比较好切向流过滤装置。
Pellicon®3 膜包将硬聚丙烯外壳和膜端帽整合,这样的结构可保护超滤膜,使超滤膜免受碰撞和其它潜在损坏的影响。同时将垫圈整合进膜包端帽,因此安装时不需要使用额外的膜包间垫片。
Pellicon®3 膜包独特的结构设计及全自动制造工艺提供了****的表现一致性和在不同型号膜包间更精细的线性放大能力。
Pellicon®3 Biomax® 盒式超滤膜包是要求高流量,中低蛋白结合和苛刻化学清洗 / 消毒等应用的优先装置。
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Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。特点与优点:有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜提供无菌包装和非无菌包装形式产品过滤速度快,数据稳定、重现性好上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用顶盖颜色标识易于区分膜孔径上海Millipore密理博批发
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