微孔滤膜的额定孔径通常以微米值给出, 大于此值的颗粒将被截留。微滤膜孔隙 范围从 0.025 µm(用于核酸和蛋白质的微 透析技术)到0.1-0.22 µm(用于除菌过滤), 到 0.3-0.45 µm(用于净化或微生物截留), 到 0.45-8.0 µm(用于空气或流体颗粒监 控)。孔径为 0.22 µm 的过滤器较常用于 除菌过滤,且足以去除细菌。但 如果溶液含动物血清,则需要使用孔径 为 0.1 µm 的过滤器来去除支原体。
膜直径 特殊应用所需的过滤器直径取决于过滤 溶液的体积和流速(流量)。 膜通量和过滤能力 过滤溶液的速度和效率取决于膜的过滤 能力(或通量)。当过滤大量或严重污 染的溶液如粗制细胞裂解物时,膜孔可 达到较大过滤能力,默克密理博 Express® (PES)膜过滤器具有较高过滤能力。其不对称的孔径设计使大颗粒保留在顶 部,不堵塞截留细菌的小孔,从而提高 过滤能力并延长过滤器的使用寿命。 Millipore密理博Strat-M皮肤膜。湖南离心管Millipore密理博诚信经营
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(百分之十的)大分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压搅拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是较佳选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。广西盒式超滤膜包Millipore密理博用途超滤离心管实验室耗材。
用膜来对样品进行处理好处很多,操作简便,效果稳定可靠,成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时,主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等;选择较合适的装置时,还要考虑样品的体积和装置的动力设计,比如真空或加压配套设备等。
深层过滤介质(左)内部结构松散、排列无序,通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜(中)由规则、连续的网状多聚物构成,具有精确的孔径,用来截留细菌、胶体及微小颗粒。
超滤膜(右)通常有两个明显的分层:致密的表层,厚 0.1-1.5μm,孔径 10-400Å;下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格,用于生物大分子样品处理,应用多样。
外泌小体(Exosome)是一种囊泡结构,直径通常在30-150nm,常见于正常体液和病理样本,培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体,其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流,影响和调控着多方面的生理功能,包括免疫促进、凋亡调控、血管生成、炎症反应及发育和分化等。由于在体液中出现,外泌小体对于临床生物标志物检测特别有利,成为体外诊断、biomarker研究的新热点。近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求,以及起始样品的规模、数量,可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒,对操作人员也没有特别的经验要求,超滤法后来居上,成为实验室中制备外泌体的通用方法。Amicon® Ultra超滤管。
用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL;死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同,样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计,加快处理速度;反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法,是非常方便的工具。
Microcon®为横膜式超滤管,没有死体积,用于大分子样品的浓缩、脱盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分离,比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。这种小管适合在1.5mL离心机中使用,其Ultracel®超滤膜对于蛋白及其它成分都表现出极低的非特异性结合,连同医药级O型圈封闭设计,确保更少的样品丢失,更稳定的数据结果。诸多考虑周到的精细设计使Microcon®成为较好用的样品制备工具之一。 Millipore Stericup® 过滤杯。浙江超滤离心管Millipore密理博代理
Millipore聚碳酸酯膜用途。湖南离心管Millipore密理博诚信经营
切向流过滤技术
切向流超滤技术是目前普遍采用的一种膜分离技术,属于分子量水平的切向流过滤,通常截流分子量范围:1-1000 kD。超滤 (Ultrafiltration, UF) 是对溶液中的极小颗粒及可溶性分子进行分离的方法。这种分离主要基于分子的大小,但滤膜介质的通透性也会受样品的化学、分子及电荷特性的影响。超滤通常只能分离那些大小相差 3-5 倍以上的分子,而不适合分离大小相似的分子。
应用范围:
澄清 , 如:分离细胞 / 细胞碎片 ( 细胞收集细胞去除 )
浓缩 , 如:蛋白浓缩,去除水 / 缓冲溶液
脱盐
缓冲溶液的置换 , 如:层析前后缓冲液体系的改变
除热原 , 如:中药注射剂的热原去除
分离 / 纯化 , 如:蛋白、多肽、多糖、病毒、内病毒颗粒、
核酸、抗体
湖南离心管Millipore密理博诚信经营上海登宁科技有限公司致力于仪器仪表,以科技创新实现***管理的追求。上海登宁深耕行业多年,始终以客户的需求为向导,为客户提供***的实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材。上海登宁继续坚定不移地走高质量发展道路,既要实现基本面稳定增长,又要聚焦关键领域,实现转型再突破。上海登宁创始人刘德发,始终关注客户,创新科技,竭诚为客户提供良好的服务。