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Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？

A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案

A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。

Pellicon® 3 Biomax® 盒式超滤膜包。广东亲水性滤膜Millipore密理博销售

外泌小体（Exosome）是一种囊泡结构，直径通常在30-150nm，常见于正常体液和病理样本，培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体，其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流，影响和调控着多方面的生理功能，包括免疫促进、凋亡调控、血管生成、炎症反应及发育和分化等。由于在体液中出现，外泌小体对于临床生物标志物检测特别有利，成为体外诊断、biomarker研究的新热点。近年来随着分离纯化技术的提高，关于外泌小体的研究成果颇丰；这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索，已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求，以及起始样品的规模、数量，可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒，对操作人员也没有特别的经验要求，超滤法后来居上，成为实验室中制备外泌体的通用方法。浙江过滤系统Millipore密理博厂家Millipore TS2预处理柱。

微滤（MF）是使用微孔膜介质（即常见的滤膜），将大小在 0.025μm 到 10.0μm 之间的颗粒物或生物体从溶液中除去。虽然某些非膜材质或深层介质（如厚的玻璃纤维）也能够去除颗粒，但只有滤膜具有精确的孔径才能实现比较准确的截留。在细胞培养实验中，微滤较常被用来做样品的除菌处理（0.1μm 微滤可以去除支原体等）；在核酸和蛋白分析之前，也需要用微滤除去细胞裂解液中的完整细胞和细胞碎片。用于这类分离的膜孔径一般在 0.05μm 到 1.0μ

对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel®再生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附较小，是 Amicon® Ultra超滤管等超滤产品成为首要选择关键之一。滤膜和装置表面对溶质的吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向流系统，支持您获得理想的处理效果。Millipore除菌过滤器。

Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度（百分之十的）大分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时，向超滤装置中导入气压，大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内，水及小于超滤膜截留分子量的溶质（如盐分）会被过滤并排出。加压搅拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀，比离心超滤温和，对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是较佳选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用，更为经济。Millipore密理博超滤膜。湖北疏水性滤膜Millipore密理博种类

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微孔滤膜的额定孔径通常以微米值给出， 大于此值的颗粒将被截留。微滤膜孔隙 范围从 0.025 µm（用于核酸和蛋白质的微 透析技术）到0.1-0.22 µm（用于除菌过滤）， 到 0.3-0.45 µm（用于净化或微生物截留）， 到 0.45-8.0 µm（用于空气或流体颗粒监 控）。孔径为 0.22 µm 的过滤器较常用于 除菌过滤，且足以去除细菌。但 如果溶液含动物血清，则需要使用孔径 为 0.1 µm 的过滤器来去除支原体。

膜直径 特殊应用所需的过滤器直径取决于过滤 溶液的体积和流速（流量）。 膜通量和过滤能力 过滤溶液的速度和效率取决于膜的过滤 能力（或通量）。当过滤大量或严重污 染的溶液如粗制细胞裂解物时，膜孔可 达到较大过滤能力，默克密理博 Express® （PES）膜过滤器具有较高过滤能力。其不对称的孔径设计使大颗粒保留在顶 部，不堵塞截留细菌的小孔，从而提高 过滤能力并延长过滤器的使用寿命。 广东亲水性滤膜Millipore密理博销售

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