用膜来对样品进行处理好处很多,操作简便,效果稳定可靠,成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时,主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等;选择较合适的装置时,还要考虑样品的体积和装置的动力设计,比如真空或加压配套设备等。
深层过滤介质(左)内部结构松散、排列无序,通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜(中)由规则、连续的网状多聚物构成,具有精确的孔径,用来截留细菌、胶体及微小颗粒。
超滤膜(右)通常有两个明显的分层:致密的表层,厚 0.1-1.5μm,孔径 10-400Å;下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格,用于生物大分子样品处理,应用多样。
较大化样品回收率
浓缩液中的样本回收量低可能由于吸附损失、过度浓缩、或者样本穿过滤膜造成。
吸附损失取决于溶质浓度、其疏水性、温度、与过滤装置表面的接触时间、样本成分及pH值。 为较大限度地降低损失,离心后请立即取走浓缩后样本。
如果样本起始浓度高,请监视离心过程,以免使样本过度浓缩。 过度浓缩可导致沉淀和样本损失。
如果样本看起来渗过了滤膜,请选用较低MWCO的Amicon® Ultra-15装置。
以***膜为重点技术,默克密理博为蛋白、核酸、病毒、囊泡等生物样品和微珠(纳米颗粒)的浓缩、脱盐、换液提供多样化操作工具。您可以方便地从以下产品中,根据起始样品体积和特别的要求,选择较适合处理方案。 北京滤膜Millipore密理博批发Millipore无菌针头式过滤器。
Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品,在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
Microcon® DNA Fast Flow 超滤管,专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质,医用级O型圈密封,保证了在洗涤步骤中样品丢失较少。反转回收设计,即使样品量很小也能获得理想的得率,浓缩倍数可以达到20X。
非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在较恒定、温和的条件下高效换液。上海登宁过滤膜质量保证。
温度:通常增加操作时的温度可以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。实践中一般是以样品和设备能耐受的较高温度来操作。pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。
Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品,在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
上海登宁科技有限公司Millipore滤膜。江苏亲水性滤膜Millipore密理博一级代理
装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。河南疏水性滤膜Millipore密理博使用
除盐或渗滤
除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。 可以在Amicon® Ultra-15装置中,通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式,去除盐分或更换缓冲液。 可重复“洗出”过程,直到污染微溶质的浓度充分降低为止
流速
影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。图1和表1可用来估计达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。 15 mL样本旋转时间一般约需15至40分钟。 尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过,但一般在旋转15至40分钟之后才能达到较低浓缩液体积(100–150 μL)。
河南疏水性滤膜Millipore密理博使用
上海登宁科技有限公司致力于仪器仪表,是一家贸易型的公司。公司业务分为实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供良好的产品和服务。公司注重以质量为中心,以服务为理念,秉持诚信为本的理念,打造仪器仪表良好品牌。上海登宁秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。