用膜来对样品进行处理好处很多,操作简便,效果稳定可靠,成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时,主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等;选择较合适的装置时,还要考虑样品的体积和装置的动力设计,比如真空或加压配套设备等。
深层过滤介质(左)内部结构松散、排列无序,通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜(中)由规则、连续的网状多聚物构成,具有精确的孔径,用来截留细菌、胶体及微小颗粒。
超滤膜(右)通常有两个明显的分层:致密的表层,厚 0.1-1.5μm,孔径 10-400Å;下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格,用于生物大分子样品处理,应用多样。
样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。 上海混合纤维素滤膜Millipore密理博厂家上海登宁Millipore密理博离心管。
除盐或渗滤
除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。 可以在Amicon® Ultra-15装置中,通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式,去除盐分或更换缓冲液。 可重复“洗出”过程,直到污染微溶质的浓度充分降低为止
流速
影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。图1和表1可用来估计达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。 15 mL样本旋转时间一般约需15至40分钟。 尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过,但一般在旋转15至40分钟之后才能达到较低浓缩液体积(100–150 μL)。
Amicon® Pro 纯化超滤系统目前的蛋白纯化常常包括很多步骤,用到多种器具,却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险,减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间,默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作,使纯化浓缩蛋白变得简便高效,数据稳定易得。高产:没有样品转移,损失更少温和:特别的渗滤设计使换液过程更温和快速:从细胞裂解到纯化、优化一共需要5次低速离心灵活:一种离心方法,多方面支持各种样品制备所需上海登宁过滤膜安心售后。
微滤中膜的孔径大小通常以微米计,表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据 NMWL 分级,有时也用截留分子量(MWCO)。NMWL 表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL 的超滤膜应该截留至少 90% 以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见,实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时,孔径减小会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时,需要谨慎地选择合适的 NMWL 膜和设备。虽然影响因素较多,我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜,这样可以较大化样品的回收,同时节省过滤时间。密理博滤膜上海一级代理。广东PC滤膜Millipore密理博批发
上海登宁Millipore一级代理。广东PC滤膜Millipore密理博批发
三种材质的膜可供选择 采 用 默 克 密 理 博 Express PLUS(PES) 膜 的 Millex 过滤器具有较快的流速,双倍于 25 mm 标准针头式过滤器的通量。Durapore 膜在所 有膜中的蛋白吸附较低,推荐用于过滤含有 蛋白质的溶液。尼龙材质具有广阔的化学相 容性,可以用于水溶液和有机溶液的一般性 过滤。 低溶出性 外壳材料和膜的溶出物很低,不会干扰分析 产品。 自动生产过程 33 mm Millex 过滤器的生产过程从膜切割到包 装都是通过流水线装置完全自动进行的以使 污染的风险较小化。广东PC滤膜Millipore密理博批发
上海登宁科技有限公司是一家从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,橡塑制品、实验室设备、仪器仪表、机电设备、汽车配件、摩托车配件、通讯设备、家用电器、机械设备、工具量具、电动工具、刀 具、五金交电、电线电缆、音响设备、计算机、软件及辅助设备、体育用品、办公用品、文具用品、安防设备、电子元器件的批发、零售。的公司,致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。公司自创立以来,投身于实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材,是仪器仪表的主力军。上海登宁致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心,为用户带来良好体验。上海登宁创始人刘德发,始终关注客户,创新科技,竭诚为客户提供良好的服务。