外泌小体(Exosome)是一种囊泡结构,直径通常在30-150nm,常见于正常体液和病理样本,培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体,其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流,影响和调控着多方面的生理功能,包括免疫促进、凋亡调控、血管生成、炎症反应及发育和分化等。由于在体液中出现,外泌小体对于临床生物标志物检测特别有利,成为体外诊断、biomarker研究的新热点。近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求,以及起始样品的规模、数量,可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒,对操作人员也没有特别的经验要求,超滤法后来居上,成为实验室中制备外泌体的通用方法。Pellicon® 3 Biomax® 盒式超滤膜包。四川PC滤膜Millipore密理博品牌
Pellicon® 3 Biomax® 盒式超滤膜包
Pellicon®3 Biomax® 盒式超滤膜包是先进的高性能超滤膜包,装有无缺陷型 Biomax® 改良聚醚砜复合膜,具有独特的聚丙烯外壳,热熔合构造。是用于单克隆抗体、白蛋白、***、疫苗和生长因子等产品的比较好切向流过滤装置。
Pellicon®3 膜包将硬聚丙烯外壳和膜端帽整合,这样的结构可保护超滤膜,使超滤膜免受碰撞和其它潜在损坏的影响。同时将垫圈整合进膜包端帽,因此安装时不需要使用额外的膜包间垫片。
Pellicon®3 膜包独特的结构设计及全自动制造工艺提供了****的表现一致性和在不同型号膜包间更精细的线性放大能力。
Pellicon®3 Biomax® 盒式超滤膜包是要求高流量,中低蛋白结合和苛刻化学清洗 / 消毒等应用的优先装置。
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用膜来对样品进行处理好处很多,操作简便,效果稳定可靠,成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时,主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等;选择较合适的装置时,还要考虑样品的体积和装置的动力设计,比如真空或加压配套设备等。
深层过滤介质(左)内部结构松散、排列无序,通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜(中)由规则、连续的网状多聚物构成,具有精确的孔径,用来截留细菌、胶体及微小颗粒。
超滤膜(右)通常有两个明显的分层:致密的表层,厚 0.1-1.5μm,孔径 10-400Å;下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格,用于生物大分子样品处理,应用多样。
Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除菌、除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。
特点与优点
有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择
采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜
提供无菌包装和非无菌包装形式产品
过滤速度快,数据稳定、重现性好
上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)
配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用
顶盖颜色标识易于区分膜孔径
Millipore超纯水UV灯。
预过滤 另一种延长过滤器寿命和过滤通量的方 法是在上方添加预过滤膜。有机溶剂通 常使用聚丙烯过滤器进行预过滤,孔径 在 0.6-30 µm 之间。这些聚丙烯过滤器先 用酒精湿润后,还可以用于水溶液中。 水溶液通常使用含有粘合树脂的玻璃纤 维预过滤膜净化,该预过滤膜具有较高 的湿强度,并能从严重污染的液体中提 取污染物。如果您担心玻璃纤维脱落可 使用密理博的 RW 型预过滤器,其使用的 是防脱落材料(形成围绕成聚脂网络的 纤维素酯的聚合物)。RW 型预过滤膜与 玻璃纤维过滤膜具有相同的纳污能力。Millipore离心管价格。四川PC滤膜Millipore密理博品牌
Millipore TS2预处理柱。四川PC滤膜Millipore密理博品牌
通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示,采 用 100k NMWL 滤 膜,大 于 100kDa 的分子截留率>90%,但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜,75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果四川PC滤膜Millipore密理博品牌
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