如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器
1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本(如果使用定角转子则为12 mL)。
2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中,用一个类似的装置抵住。
3. 当使用摆桶转子时,以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。
当使用定角转子时,装置的方向要使滤膜面板朝上,以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。
说明: 关于典型旋转时间,请参见图1和表1。
4. 如要回收浓缩后的溶质,在过滤装置底部插入一个移液管,然后左右摇摆着吸取样本,以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。
说明: 要想达到理想回收,离心后请立即取走浓缩后样本。
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用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL;死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同,样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计,加快处理速度;反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法,是非常方便的工具。
Microcon®为横膜式超滤管,没有死体积,用于大分子样品的浓缩、脱盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分离,比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。这种小管适合在1.5mL离心机中使用,其Ultracel®超滤膜对于蛋白及其它成分都表现出极低的非特异性结合,连同医药级O型圈封闭设计,确保更少的样品丢失,更稳定的数据结果。诸多考虑周到的精细设计使Microcon®成为较好用的样品制备工具之一。 吉林PTFE滤膜Millipore密理博Millipore聚醚砜PES滤膜。
样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
较大化样品回收率
浓缩液中的样本回收量低可能由于吸附损失、过度浓缩、或者样本穿过滤膜造成。
吸附损失取决于溶质浓度、其疏水性、温度、与过滤装置表面的接触时间、样本成分及pH值。 为较大限度地降低损失,离心后请立即取走浓缩后样本。
如果样本起始浓度高,请监视离心过程,以免使样本过度浓缩。 过度浓缩可导致沉淀和样本损失。
如果样本看起来渗过了滤膜,请选用较低MWCO的Amicon® Ultra-15装置。
以***膜为重点技术,默克密理博为蛋白、核酸、病毒、囊泡等生物样品和微珠(纳米颗粒)的浓缩、脱盐、换液提供多样化操作工具。您可以方便地从以下产品中,根据起始样品体积和特别的要求,选择较适合处理方案。 上海Millipore过滤膜的特点分析。
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(百分之十的)大分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压搅拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是较佳选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。上海登宁Millipore密理博品质保障。陕西PC滤膜Millipore密理博销售
Millipore TS2预处理柱。湖南纯水机耗材Millipore密理博品牌
Centriprep®超滤管是一次性使用的离心管,可以用于2-15mL生物样品的纯化、浓缩、脱盐等过滤应用。这种离心超滤管流速很快,设计紧凑,螺旋盖使用起来非常方便,过滤收集管内置低吸附的Ultracel®再生纤维素膜,装有气密盖。优点与应用特有的反向流操作模式,较大的死体积,采用Ultracel®膜,用于浓缩和纯化富含颗粒物,的高浓度样品,样品回收率>90%,配合标准的50mL离心管吊篮式转子使用,从发酵培养基、细胞培养基、细胞裂解液中分,离低分子量溶质湖南纯水机耗材Millipore密理博品牌
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