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温度：通常增加操作时的温度可以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。实践中一般是以样品和设备能耐受的较高温度来操作。pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的pI 值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。

Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品，在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用

Millipore TS2预处理柱。广西聚碳酸酯滤膜Millipore密理博使用

微滤（MF）是使用微孔膜介质（即常见的滤膜），将大小在 0.025μm 到 10.0μm 之间的颗粒物或生物体从溶液中除去。虽然某些非膜材质或深层介质（如厚的玻璃纤维）也能够去除颗粒，但只有滤膜具有精确的孔径才能实现比较准确的截留。在细胞培养实验中，微滤较常被用来做样品的除菌处理（0.1μm 微滤可以去除支原体等）；在核酸和蛋白分析之前，也需要用微滤除去细胞裂解液中的完整细胞和细胞碎片。用于这类分离的膜孔径一般在 0.05μm 到 1.0μ上海超滤膜Millipore密理博批发上海登宁Millipore滤膜价格。

用膜来对样品进行处理好处很多，操作简便，效果稳定可靠，成本效益高。实践中选择膜材质及相关装置时，主要要考虑处理样品的性质、处理量及要求的处理效果等；选择较合适的装置时，还要考虑样品的体积和装置的动力设计，比如真空或加压配套设备等。

深层过滤介质（左）内部结构松散、排列无序，通常用于去除大颗粒物的预过滤。微滤膜（中）由规则、连续的网状多聚物构成，具有精确的孔径，用来截留细菌、胶体及微小颗粒。

超滤膜（右）通常有两个明显的分层：致密的表层，厚 0.1-1.5μm，孔径 10-400Å；下层是多孔支撑物。超滤膜依赖生产工艺严格控制膜孔径规格，用于生物大分子样品处理，应用多样。

Q：A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理？

A：提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的，同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在，大 小 在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案

A：Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。

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微滤中膜的孔径大小通常以微米计，表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据 NMWL 分级，有时也用截留分子量（MWCO）。NMWL 表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL 的超滤膜应该截留至少 90% 以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见，实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时，孔径减小会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时，需要谨慎地选择合适的 NMWL 膜和设备。虽然影响因素较多，我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以较大化样品的回收，同时节省过滤时间。上海登宁Millipore滤膜。河南疏水性滤膜Millipore密理博规格

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• 在过滤过程中，可进行自动、连续 溶剂和转移过滤。无需倾倒 • 2 L 的接收瓶包括瓶塞和储存用的导 管，避免过滤后溶液的转移，从而 降低了工作量和污染风险 • 圆锥形底 2 L 接收瓶可以储存全部 过滤的溶剂 / 缓冲液 MilliSolve 过滤系统专为在真空过滤液 相色谱（LC）缓冲液和溶剂设计的。 该系统使用 0.45 µm 表面滤膜来去除 可能会缩短色谱柱使用寿命的颗粒。 使用 MillSolve 系统进行真空过滤还会从缓冲液中去除大部分的溶解气体， 从而降低气泡影响 LC 设备的风险。 使用自动和连续过滤，在过滤过程中 无需向漏斗中添加液体。过滤在封闭 式系统中进行—这在过滤危险液体时 很重要。 如果要求开放式漏斗过滤，则可以使 用 300 mL 漏斗替换真空盖广西聚碳酸酯滤膜Millipore密理博使用

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