钙成像技术在许多领域都有广泛的应用,以下是一些常见的应用场景:1.神经科学研究:钙成像技术被广泛应用于研究神经元活动和神经网络的功能。可以观察神经元的钙离子动态变化,揭示神经元的兴奋性和抑制性活动,研究神经网络的连接和信息传递。2.细胞信号传导研究:钙离子在细胞内起着重要的信号传导作用。钙成像技术可以用于研究细胞内钙离子的浓度变化,揭示细胞信号传导的机制和调控过程。3.细胞凋亡研究:钙离子在细胞凋亡过程中扮演重要角色。钙成像技术可以用于观察细胞内钙离子的变化,研究细胞凋亡的启动和执行过程。4.药理学研究:钙成像技术可以用于评估药物对细胞内钙离子浓度的影响。可以研究药物的作用机制、药物的剂量效应关系等。5.疾病研究:钙成像技术可以应用于研究与钙离子信号传导相关的疾病,如神经退行性疾病、心血管疾病等。可以揭示疾病发生及发展的机制,为疾病的诊断和诊疗提供依据。总之,钙成像技术在神经科学、细胞生物学、药理学和疾病研究等领域都有广泛的应用,可以帮助揭示生物过程的机制和疾病的发生及发展过程。通过钙成像技术发现神经元的活动与其内部的钙离子浓度密切相关。合肥光遗传钙成像nVista
对于双光子(2P)钙成像而言,离焦和近表面荧光激发是两个大的深度限制因素,而对于三光子成像这两个问题大大减小,但是三光子成像由于荧光团的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高数量级的脉冲能量才能获得与2P激发的相同强度的荧光信号。功能性三光子显微镜比结构性三光子显微镜的要求更高,它需要更快速的扫描,以便及时采样神经元活动;需要更高的脉冲能量,以便在每个像素停留时间内收集足够的信号。复杂的行为通常涉及到大型的大脑神经网络,该网络既具有局部的连接又具有远程的连接。要想将神经元活动与行为联系起来,需要同时监控非常庞大且分布guangfan的神经元的活动,大脑中的神经网络会在几十毫秒内处理传入的刺激,要想了解这种快速的神经元动力学,就需要MPM具备对神经元进行快速成像的能力。快速MPM方法可分为单束扫描技术和多束扫描技术合肥在体钙成像多少钱钙成像显微镜由软件控制的电子对焦方式,让成像更加稳定清晰。
紫外光激发Ca2+荧光探针Fura-2和Indo-1都是紫外光激发的双波长Ca2+荧光指示剂,也是目前较常用的比率型钙离子荧光探针。与其他代的荧光指示剂相比,它们的荧光信号更强,对Ca2+的选择性也更强。比率指示剂会在与Ca2+结合后会改变吸收/发射特性。以双波长激发指示剂Fura-2为例。如图2所示,低Ca2+浓度下,Fura-2在~380nm处激发,高Ca2+浓度下,在~340nm处激发。光谱由两个峰组成:左侧较短波长的吸收峰随Ca2+浓度的增加而增大,右侧较长波长的吸收峰随Ca2+浓度的增加而减小。通过340/380nm交替激发,获取在510nm处对应的发射光荧光强度的比率,就可以对Ca2+浓度进行定量的测量。因为Fura-2结果准确,且不易被漂白,所以得到了普遍使用。
哥伦比亚大学ZuckermanMind大脑行为研究所的RuiM.Costa课题组于2020年10月7日在Cell杂志上发表了一篇题为AnAmygdalaCircuitMediatesExperience-DependentMomentaryArrestsduringExploration的文章,作者开发一种用于研究小鼠探索活动中瞬时停滞行为机制的新型实验,通过行为分析、环路映射、滔博生物-Inscopix自由活动钙成像显微镜结合光遗传学手段,提供介导经验依赖性的瞬时停滞行为的BLA神经元群体的jihuo和投射证据,表明BLA-CEA环路可以作为新颖/熟悉情境的检测器和效应器,用于基于空间位置的熟悉程度来生成自定进度的行为停滞,这一响应对于动物对未知环境进行安全有效的探索是至关重要的。功能性多神经元钙成像是一种通过记录神经元内Ca2+信号变化,监测大量神经元动作电位的光学记录技术。
多种钙离子指示剂和钙成像手段的存在使研究人员能够根据具体的实验需要进行选择。同样,选择合适的检测设备也是至关重要的。对于使用CCD/sCMOS相机的成像系统来说,有两个要求是很基本的:采集速度:根据不同的应用所需的相机帧速也不同,对于神经细胞来说,一般要求相机速度至少在10fps以上,有些高速应用场景可能需要几百甚至上千Hz的帧速。灵敏度:为了尽可能降低光漂白和其他副作用(特别是蓝光激发时),需要降低激发光强度。因此相机要在较宽的发射光波长范围上具有高灵敏度,才能检测到弱光条件下的信号,并适应不同的染料的光谱发射特性。有了钙成像技术,原本悄无声息的神经活动就变成了一幅斑斓闪烁的壮观影像。美国荧光显微钙成像哪里有
传统的钙成像技术受限于显微镜的视野,只能对很小的一片区域进行记录。合肥光遗传钙成像nVista
钙成像是一种用于观察和研究细胞内钙离子浓度变化的技术。钙离子在细胞内起着重要的调节作用,参与细胞信号传导、细胞凋亡、细胞分化等生物过程。钙成像技术通过使用荧光探针或基因工程技术将荧光蛋白与钙离子结合,使其能够发出荧光信号。当细胞内钙离子浓度发生变化时,荧光信号的强度也会相应改变,从而可以通过显微镜观察到钙离子的动态变化。钙成像技术广泛应用于神经科学、细胞生物学、药理学等领域,有助于揭示钙离子在生物过程中的作用机制。合肥光遗传钙成像nVista