一般来说,在进行较大或者脆弱细胞的分选时,为了得到Z佳结果,应该使用较大的喷嘴和较低的压力;在分选较小或者非脆弱细胞时,如果要增加产量,应该使用较小的喷嘴和较高的压力。细胞分析仪可以对不同的单细胞悬液进行检测,而且在确保细胞数量足够的前提下,可以在短时间内获取大量的细胞,可以同时检测数百万的细胞。细胞分析仪可以对单个细胞的多种特征进行分析,对单个细胞的不同的参数进行分析,借助荧光染色的方式对单细胞受体的表达方式和DNA的含量等进行分析,实现了定量分析和定性分析的结合。细胞分析仪可以进行单个细胞的分析,支持对个体差异的分析。南京BioTek酶标仪供应商
染色体分析,流式细胞仪要求:360nm或488nm光源,450nm、580nm滤光片。BrdUrd标记追踪细胞分化,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。淋巴细胞亚群分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片,液量计数系统。白血病免疫分型,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。血小板分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测:①T系白血病微小残留病灶检测,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。②B系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。③髓系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统南京BioTek酶标仪供应商细胞分析仪是一种光学显微照相设备,用于对单个成活的细胞进行多参数分析。
流式细胞仪的其他几方面的技术改进:①荧光信号从线性测量到对数测量的改进,由于对数测量可以放大电信号,使之对弱荧光和某些药物自发荧光标本检测才得到满意的结果;②光谱重叠的校正,通过补偿修饰软件的开发应用,从而保证了各种不同激发荧光检测分析的质量;③DNA含量分析时,通过分析脉冲的面积、宽度,区分实体瘤组织标本中的粘连细胞群体,剔除DNA检测中的二联体细胞,Zda程度地减少假阳性,从而解决了实体瘤DNA分析时长期存在的关键性的难题;④过去采用激光的一种波长(如488nm)的发射光只能激发样品中一种波长的继发光,因此,只能检测细胞中一种细胞成分。现在流式细胞仪采用一种488nm激发波长的发射光,可以同时激发样品中三种或四种不同波长的继发光,这便可用于同一细胞不同成分的同步分析。
流式细胞仪在临床细菌学中的应用有:流式细胞仪泛用于细菌、病原体、血清抗体及药敏试验。在免疫荧光方法中的流式微球捕获芯片技术是流式细胞仪的一个新应用,它将近似于细胞大小的微珠作为捕获载体,使其携带已知荧光抗原或抗体,来捕获检测物中的相关抗体或抗原。由于遮蔽效应可以使荧光微球的发散光减弱,应用不同大小的荧光微球,可同时检测同一标本的多种抗原或抗体。这种方法能同时检测单一液相样本中多个目的蛋白(如同时测定多种细胞因子、多种自身抗体),检测需用标本量少,灵敏度高,重复性好,直接荧光标记易于使用,检测线性范围宽,避免酶联反应所致的人工假象,可用于单细胞分子水平的多参数检验,也可用于寄生虫、病毒或混合传染的检测。细胞分析仪在临床领域也有普遍应用,如肿瘤细胞的检测和分析。
以前的流式细胞仪,在分析细胞样品时,CV值只能达到5%~7%左右,前向角散射光分辨率只为0.3μm。流式细胞仪前向角散射光的分辨率已达到0.02μm。流式细胞仪的电信号脉冲通道,从当初的128道→256道→1024道,直到目前一般已达到40%道,有的甚至还可以达到5120道。信号脉冲通道数分布越多,对细胞的分辨率就越高,对细胞的分析就越精确。例如,目前,各流式细胞仪生产厂家生产的流式细胞仪,都能以高精确度来分析人类染色体的畸变,通过二维图显示扩展群体分布,极大地提高了流式细胞仪的分辨率。另外,通过对脉冲系统功能的改进,也提高了细胞参数分析的质量。细胞分析仪可以使用多种细胞的样本,如细胞悬浮液、过滤筛、细胞混合物等。南京BioTek酶标仪供应商
细胞分析仪逐一记录细胞的每一个荧光谱,进行单元素分析和多元素分析,具有精确性和可重复性。南京BioTek酶标仪供应商
流式细胞仪的维护保养:选择正确的荧光染料,一般原则是:低表达抗原标记高S/N(信噪比)荧光素,高表达抗原标记低S/N(信噪比)荧光素。当样品用2种以上荧光染料时,为消除干扰,需要做荧光补偿。在应用流式细胞仪软件作荧光补偿时,补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,应避免补偿不足和过度补偿。溶液使用前,所用溶液都要进行过滤处理,以免出现沉淀物而堵塞喷嘴。流式细胞仪状态稳定后,要先排除进样针内的气泡以保证喷嘴畅通,之后再对样本进行检测。南京BioTek酶标仪供应商