fluidlabR-300细胞计数的准确性和精确性
细胞计数器的准确度(也称为真实度)描述了测量值与“标准”或已知值的接近程度,而精确度(或称精密度)指的是重复测量值彼此之间的接近程度。对于细胞计数,使用血细胞计显微镜下人工计数通常被认为是标准的参考方法。然而,人工计数也容易出错、耗时,并且高度依赖于用户的专业水平。
在这里,我们比较了人工计数、fluidlabR-300和竞品获得的三种不同细胞类型和浓度的细胞计数。所获得的所有数据汇总在图3中。fluidlabR-300细胞计数的准确性在105~107细胞/mL浓度范围内可与人工计数相媲美。在较低的浓度下,准确性不同于人工计数,但与竞品相当。这可能与当视野中检测到的细胞较少时统计数字不好有关。随着细胞浓度的增加,在分析中包含了更多的细胞,误差减小。对于大多数被检测的细胞类型和浓度,fluidlabR-300细胞计数是非常精确的(如图3中的小误差线所示)。总的来说,fluidlabR-300在大范围的细胞类型和浓度上提供了精确和准确的细胞计数结果,每个样本不到30秒。
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fluidlabr-300使用全息显微技术和机器学习算法获得准确可靠的细胞计数
介绍方法
细胞样品制备hela细胞在DMEM中培养,通过胰蛋白酶化从瓶的表面分离。为了在细胞计数验证过程中尽量减少样品的变异,HeLa细胞以~106细胞/mL的浓度在冰冻培养基(10%DMSO,20%FBS,DMEM细胞培养基)中小等分冷冻,并在-20°C保存。
同样,酵母细胞(酿酒酵母菌)在酵母培养基(NaCI•蛋白胨缓冲液和蔗糖)中,在20℃下生长2天,以~107个细胞/mL的浓度在15%甘油(v/v)的水中小等份冻存在-20℃。 山东智能化fluidlabR-300便携式细胞计数仪选择fluidlab R-300便携式细胞计数仪找上海怡赛。
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结果
生长曲线
生长曲线如图1所示,并显示出坚实的线性生长行为,直到OD约为0.8,此时系统收敛到饱和状态。图1:大肠杆菌生长曲线(在0.3消光值时接种IPTG)
校准
曲线使用BSA和制造商的曲线制备说明,通过装置上应用程序“校准曲线”计算标准曲线。得到0.98的R2(图2)
图2:FluidlabR-300显示校准曲线(双倍)
生长曲线
接种过夜预培养物后,在37°C、持续振荡90小时的条件下监测大肠杆菌生长曲线。使用fluidlab的适配器3和600nm的固定波长。从预实验中表明,线性相位从0.3开始,因此此时可以用IPTG进行诱导。
fluidlab R-300光谱仪性能报告
线性线性度
可以从参考滤波器的精度测量中得到。如果测量显示了较高的精度,则可以推断线性也非常高,如图1所示。测定值间线性拟合的决定系数为R2=1,且高于欧洲药典规定的R2=0.999的限值。美国药典中没有线性目标值。因此,在消光范围从0.3到2.15之间,线性达到了理论最大值。因此,线性范围反映了光谱仪的值的范围,光谱仪要求显示消光值必须介于0到2.0之间。大多数生化和化学测定的线性范围也在这些极限值之间。
图1:HellmaAnalytics的参考值与fluidlabR300的实测值的比较。决定系数R2=1,线性值很好。y轴的交点值为0.0003,与低于系统的测量精度。 fluidlab R-300便携式分光光度计哪里有?
fluidlabR-300细菌生长和蛋白质含量的测定
材料和方法
用pLEMO质粒转化Lemo21大肠杆菌细胞,该质粒含有用于阴性选择的氯霉素抗性盒以及由上游LacOperon控制的目的蛋白的基因。我们选择了细胞色素P450酶作为模型酶,因为这些酶对芳香化合物的羟基化具有有趣的催化作用。为了获得充分的表达,将FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸添加到LB生长培养基中,以确保血红素基团的正确结合,从而形成全息复合物。
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重现性测量的可重复性是评估设备(特别是样品通道)的机械公差的影响、光谱测量随时间的稳定性和测量值记录的准确性的一个重要因素。在这方面,美国药典规定每种情况下至少6次测量,不高于0.005的标准偏差或消光值的0.5%。使用全部的参考玻璃滤光片这些值可以很容易地实现。表2显示了n=10的重复测量值表2:参考玻璃滤光片的重复性测量。所有测量系列的标准偏差均低于规定的极限值0.005,因此符合美国药典(n=10)。 贵州推荐fluidlabR-300便携式细胞计数仪报价表
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