fluidlabR-300细菌生长和蛋白质含量的测定
介绍
蛋白质功能和性能的生化分析是工业应用领域基本的研究步骤之一,例如酶的工业用途,这些酶用于降低工业过程的能耗或促进极其复杂的化学修饰。因此,在细菌细胞培养物中重组表达蛋白质是一项重要的实验室任务,这使得用户能够大量生产设计的酶。这里我们展示了fluidlabR-300的用途,帮助用户能够通过使用我们的手持设备来执行表达系统质量控制。包括通过OD600杂散光精确评估细菌生长曲线,以及通过Bradford试剂进行蛋白产量的比色测定。fluidlabR-300可以很容易地一方面在筛选实验中设置标准参数,另一方面在生产现场直接使用确定的参数,而不需要另一个方法转移步骤。 上海R-300便携式OD600测定仪代理商。河北品质fluidlabR-300便携式细胞计数仪联系方式
细胞计数仪:
成像方法:数字全息显微技术
分析方法:AI智能计数法
视场:2.3mmx2.3mm(5.3mm2)
细胞范围:3-80µm(cellcount),8-80µm(活力)
细胞浓度范围:104-107cells/mL
兼容的样品载体:anvajoacella细胞计数板(提供各种类型)
光谱分析
光源:多波长LED光源
波长范围:375-700纳米
光谱带宽:<2纳米
光度测量范围:0-2.5
兼容的样品载体:标准10mm比色皿
德国anvajo fluidlab R-300手持式细胞计数仪
德国anvajo fluidlab R-300便携式分光光度计
江苏新型fluidlabR-300便携式细胞计数仪厂家德国anvajo fluidlab R-300手持式细胞计数仪。
德国anvajofluidlabR-300手持式细胞计数仪
论述
来自异源系统(如大肠杆菌)的蛋白质表达是许多研究领域的重要工具。在这里,我们阐述了fluidlabR-300对于P450酶表达质量评估是如何完成的。使用该工具和标准化学物质可以评估到所产生的酶的纯度和血红素掺入程度只有23%。我们可以得出结论,三组数据极为接近。首先,所表达的P450氧化还原酶*为Bradford试验测定的肽总库的一小部分,该部分可以使用SDS-PAGE或甚至质谱分析来测定。其次,细胞裂解物未经离心产生高杂质,光谱中可以看见在实际含血红素部分附近有一个近紫外峰。细菌细胞对FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸的摄取可能需要监测或至少改变,以通过将酶转移到所需的小部分来改善血红素的掺入。监测也可以通过光谱法进行,使用例如铁锌作为比色测定的螯合剂。总体而言,本次质量评估的所有步骤都是通过手持设备完成的,这使得例如在生产环境中的质量控制直接可行,而无需将任何方法转移到另一个分析系统。
fluidlabR-300细胞计数器覆盖了很大的浓度范围fluidlabR-300可以自动计数细胞的浓度范围(104-107细胞/mL)。为评估线性性能,与竞品相比较,对三种不同细胞类型(HeLa,PBMCs,酵母)的样品进行连续稀释,覆盖到规定的浓度范围进行测试。图2显示了使用fluidlabR-300获得的三种不同细胞系的细胞计数,并与竞品进行了比较。高线性度(如线性回归的R2值所示)表明,fluidlabR-300细胞计数器在宽线性工作范围可稳定地检测和计数不同类型的细胞。此外,用fluidlabR-300测得的细胞总数与竞品相
当(线性拟合的斜率接近1)。 德国anvajo fluidlab R-300便携式OD600细菌细胞浓度测定仪。
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结果
生长曲线
生长曲线如图1所示,并显示出坚实的线性生长行为,直到OD约为0.8,此时系统收敛到饱和状态。图1:大肠杆菌生长曲线(在0.3消光值时接种IPTG)
校准
曲线使用BSA和制造商的曲线制备说明,通过装置上应用程序“校准曲线”计算标准曲线。得到0.98的R2(图2)
图2:FluidlabR-300显示校准曲线(双倍)
生长曲线
接种过夜预培养物后,在37°C、持续振荡90小时的条件下监测大肠杆菌生长曲线。使用fluidlab的适配器3和600nm的固定波长。从预实验中表明,线性相位从0.3开始,因此此时可以用IPTG进行诱导。 德国anvajo fluidlab R-300便携式光谱仪。云南质量fluidlabR-300便携式细胞计数仪参考价
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设备间重现性
我们在anvajo生产的每个光谱仪必须满足“精度”一节中描述的允差条件。设备间测量结果有着较小的偏差的重现性是确保用不同设备进行的测量的可比性的一个重要因素。这适用于各种应用实例:在生产工厂中,多个设备经常被放置在不同的位置进行测量,或者不同的实验室可能希望交换他们的发现和结果,因此在这种情况下,结果的可比性也必须得到保证。表4显示了在使用生产中的4个随机设备执行一系列测量后,设备之间的偏差。测点之间的比较大偏差为0.6%。因此,设备之间的偏差很小,可以对不同设备之间的测量结果进行可靠的比较。 河北品质fluidlabR-300便携式细胞计数仪联系方式
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