免疫组化染色切片的好坏直接影响着病理医生对其染色结果的判断，进而影响病理诊断，所以制作一张良好的免疫组化切片至关重要，它需要病理医生与病理技师两者间的相互协调，密切配合和共同努力，病理医生选择抗体，设置对照，判读结果，指导技术;而技术人员进行实验操作，保证染色质量。在免疫组化切片的制作过程存在多个环节，每一环节的失误都可能影响检测结果，如抗原保存，蛋白酶消化，增强技术及对抗体的管理、使用和试剂的浓度等等，因此制作一张高质量的免疫组织化学切片是多方面相互配合的结果。免疫组化的那些小知识，都在这里！宁夏组织免疫组化实验
免疫组化指的是根据抗体与抗原特异结合的原理来检测组织切片中的抗原（如蛋白）。immuno的词根来自操作中所使用的抗体，而histo意味着组织。另一种类似的技术是免疫细胞化学（Immunocytochemistry，简称ICC）。这两个词大家经常混着用，看着好像差不多，但实际上还是有点区别。IHCvsICC对于IHC，组织是来自患者或动物，经过冷冻或石蜡包埋。将这些组织制成约4μm厚的切片，封片后再处理。通过这种方法，研究人员可观察细胞组分的定位，同时维持周围组织的原先结构。对于ICC，大部分细胞外基质及其他基质组分被去除，只剩下整个细胞来染色。ICC的来源可以是细胞悬液，来自患者或动物（如血涂片、拭子等），或在实验室中进行的组织培养细胞系。 吉林什么是免疫组化要多久病理报告中的免疫组化到底有什么作用?
做免疫组化时如何选择一抗？
1、单克隆和多克隆抗体的选择。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。
2、应用范围的选择。有的一抗只能用于Westernblotting，或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等；甚至标明石蜡切片或冰冻切片。
3、种属反应性的选择（speciesreactivity）。这一点很重要，表明这种抗体可能存在种属差别，且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。
4、种属来源，一般兔来源的多是多克隆抗体；而小鼠来源的多是单克隆抗体，但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。
5、生产厂家的选择。
确定来源不明的转移瘤的原发部位，临床上免疫组化也可以进行操作。对于来源不明的转移瘤，用免疫组化技术有助于确定恶性cancer的组织学来源，进一步确定原发部位。如角蛋白抗体(CK20)在胃肠道cancer、胆管cancer、胰腺cancer中阳性，而在肺cancer、乳腺cancer、肾cancer中阴性;Tg阳性可考虑甲状腺转移;波形蛋白(Vimentin)阳性支持肉瘤的诊断;前列腺特异性抗原(PSA)阳性可考虑前列腺转移;甲状腺球蛋白阳性可考虑甲状腺滤泡细胞cancer;肌动蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、结蛋白(Desmin)、肌红蛋白(Myoglobin)阳性可考虑横纹肌肉瘤;S-100蛋白阳性支持黑色素瘤的诊断;等等这些都为cancer的医疗及预后提供了依据。英瀚斯生物实验外包，多种病理染色熟练掌握，可做免疫组化！
免疫组化实验流程介绍：
英瀚斯生物为您整理总结免疫组化详细步骤：
1、SP三步法
1）石蜡切片，常规脱蜡至水。
2）0.3%或3%H2O2去离子水（无色液体）孵育10-30分钟，以灭活内源性过氧化物酶活性。
3）蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟
4）候选步骤：采用抗原修复：微波（建议30分钟内4次中火）、高压、酶修复方法。自然冷却，再用3分钟×3次.
5）血清封闭：室温15-30分钟，尽可能与二抗来源一致。倾去，勿洗。
6）滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2~3小时或4℃过夜（比较好复温）。PBS冲洗，3分钟×5次。
7）滴加生物素标记的二抗，室温或37℃孵育30分钟-1h。
8）PBS冲洗，3分钟×5次。
9）滴加SP（链霉亲和素-过氧化物酶），室温或37℃孵育30分钟-1h。
10）PBS冲洗，3分钟×5次。
11）显色剂显色（DAB等）。
12）自来水充分冲洗。
13）可进行复染，脱水，透明。
14）选择适当的封片剂封片。 做好免疫组化，你需要了解这些！浙江大鼠免疫组化价格
免疫组化怎么做？步骤方法？宁夏组织免疫组化实验
英瀚斯生物为您整理免疫组化实验步骤
1、石蜡切片置于65℃烘箱中烘片2h，脱蜡至水，用PBS冲洗三次，每次5min。
2、切片置于EDTA缓冲液中微波修复，中火至沸后断电，间隔10min低火至沸。
3、自然冷却后PBS洗3次，每次5min。4、切片放入3%过氧化氢溶液，室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶。
5、PBS洗3次，每次5min，甩干后5%BSA封闭20min（封闭电荷）。
6、去除BSA液，每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织，4℃过夜。
7、PBS洗3次，每次5min。
8、去除PBS液，每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗，4℃孵育50min。
9、PBS洗3次，每次5min。
10、去除PBS液，每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液，显微镜控制显色。
11、显色完全后，蒸馏水或自来水冲洗，苏木素复染，1%盐酸酒精分化（1s），自来水冲洗，氨水返蓝，流水冲洗。
12、切片经过梯度酒精（70-100%）10min一个梯度，脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。 宁夏组织免疫组化实验
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