什么是免疫组化?免疫组化的原理是什么?
1、定义:用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。
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2、原理:根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 免疫组化实验原理,操作步骤尽在英瀚斯实验外包。黑龙江切片免疫组化怎么选择

英瀚斯生物为您整理免疫组化实验步骤
1、石蜡切片置于65℃烘箱中烘片2h,脱蜡至水,用PBS冲洗三次,每次5min。
2、切片置于EDTA缓冲液中微波修复,中火至沸后断电,间隔10min低火至沸。
3、自然冷却后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。
5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封闭20min(封闭电荷)。
6、去除BSA液,每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织,4℃过夜。
7、PBS洗3次,每次5min。
8、去除PBS液,每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗,4℃孵育50min。
9、PBS洗3次,每次5min。
10、去除PBS液,每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液,显微镜控制显色。
11、显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,1%盐酸酒精分化(1s),自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
12、切片经过梯度酒精(70-100%)10min一个梯度,脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。 湖南切片免疫组化是什么在南京英瀚斯做的免疫组化,效果不错!

免疫组化技术应用于临床cancer良恶性的判断,英瀚斯生物为您介绍。对于反应性增生还是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。在滤泡反应性增生时,滤泡反应中心的细胞不表达细胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2阴性;而在滤泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性滤泡细胞有bcl-2的高表达,bcl-2阳性。而增殖细胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通过对cancer细胞增生的程度作出评价,从而提示增生细胞的良恶性。
细胞爬片免疫组化检测实验步骤
1、选择贴壁良好的细胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。
2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。
4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封闭20min(封闭电荷)。
5、去除BSA液,每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织,4℃过夜。
6、PBS洗3次,每次5min。
英瀚斯生物,细胞、动物、临床样本免疫组化检测都可完成!
7、去除PBS液,每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗,4℃孵育50min。
8、PBS洗3次,每次5min。
9、去除PBS液,每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液,显微镜控制显色。
10、显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,1%盐酸酒精分化(1s),自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
11、切片经过梯度酒精(70-100%)10min一个梯度,脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。 英瀚斯生物,可做免疫组化定量分析。

免疫组化有哪几种分类 ?
1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。
2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。
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3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(***)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 英瀚斯实验外包,病理染色切片免疫组化,效率高!江苏大鼠免疫组化
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免疫组化的发展路程?在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断cancer、cancer分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及cancer形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一些局限性。深入研究免疫组化原理和技术,必须熟悉各种抗体真阳性反应部位,实现实验室间免疫组化标准化,使免疫组化在病理诊断中发挥比较大的辅助作用。如果您有免疫组化相关的实验,可以与我们英瀚斯生物进行联系。黑龙江切片免疫组化怎么选择
南京英瀚斯生物科技有限公司位于南京市栖霞区燕子矶街道和燕路371号东南大学国家大学科技园科创楼A311,拥有一支专业的技术团队。在英瀚斯生物近多年发展历史,公司旗下现有品牌英瀚斯等。公司不仅*提供专业的医学实验外包、动物实验外包、细胞实验外包、分子实验检测、病理染色检测、科研实验外包、动物模型构建、第三方检测、病理组织切片、细胞培养、电生理检测、医学研究和试验发展、生物医药技术研发、技术转让、技术咨询及技术服务,同时还建立了完善的售后服务体系,为客户提供良好的产品和服务。诚实、守信是对企业的经营要求,也是我们做人的基本准则。公司致力于打造***的实验外包,动物模型构建,细胞分子实验,病理检测。