选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑:
【二抗的种属来源】
一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。有相应的驴来源的二抗,非常适合做类似双标的免疫实验。
【是否经过血清吸附过的二抗】
为减少二抗与样本的非特异性结合,我们还能为您提供不同血清吸附的原装进口二抗。如您的检测样本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗就需要选择抗小鼠源的二抗,如果您对实验的特异性要求很高,那我们向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗,这种二抗由于经过人血清吸附而排除了与人源组织(如IgG等)可能发生非特异性反应的IgG,因此将非特异性结合降低到比较低。 人源化抗体区域:抗体的恒定区部分,类别:嵌合抗体、改型抗体等,优点:减少异源抗体对机体的免疫副反应。吉林犬抗体哪里有
抗体基因重排:抗体的L链是由C、V、J三个基因簇编码的,H链由C、V、D、J四个基因簇编码的。V是编码可变区,有300个种类;D编码高变区,有15 ~ 20个种类;J编码连接V、C的结合区,有4~5个种类;C编码恒定区,*有一种。这些外显子通过多种多样的重排,所合成出的肽链,还要再进一步进行L和H链组合,这样***生成的抗体种类就非常多了。抗体基因重排是发生在淋巴细胞分化的时候。抗体的主要功能从而有效地***侵入机体内的微生物、寄生虫等异物,中和它们所释放的***或***某些自身抗原,使机体保持正常平衡,但有时也会对机体造成病理性损害,如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生,对人体可造成危害。 湖南cst抗体二抗抗体的组成极为复杂,是由成千上万、多种多样的Ig分子所组成。
【一抗的类别亚型】
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类亚类的情况下,可以选用抗相应物种IgG。艾美捷能为您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特异性只结合IgM的Anti(mu)Antibody、IgA的Anti(alpha-Antibody、IgE的AntiIgE(epsilon)Antibody等。
改型抗体也称CDR植入抗体(CDRgraftingantibody),抗体可变区的CDR是抗体识别和结合抗原的区域,直接决定抗体的特异性。将鼠源单抗的CDR移植至人源抗体可变区,替代人源抗体CDR,使人源抗体获得鼠源单抗的抗原结合特异性,同时减少其异源性。然而,抗原虽然主要和抗体的CDR接触,但FR区也常参与作用,影响CDR的空间构型。因此换成人源FR区后,这种鼠源CDR和人源FR相嵌的V区,可能改变了单抗原有的CDR构型,结合抗原的能力会下降甚至明显下降。虽然已能对抗体进行分子设计,在人源FR区引入鼠源FR区的某些关键残基,如配置得当,其亲和力可与原有小鼠抗体的亲和力相当,但人化抗体常达不到原有鼠源单抗的亲和力。 中和抗体 为与病毒结合后,可使病毒失去***性的抗体。
第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,对异种动物进行免疫,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。如用抗AIVHs亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体兔抗AIVIgG为第二抗体。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用大面积,如westernblot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),兔疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,很大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号很大增强,提高了实验灵敏度。 抗体(antibody)是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。上海犬抗体多少钱
沉淀素指与抗原结合后可发生沉淀反应的抗体。吉林犬抗体哪里有
人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造,重新表达的抗体,其大部分氨基酸序列为人源序列取代,基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,又降低了其异源性,有利应用于人体。
人源化抗体就是指抗体的恒定区部分(即CH和CL区)或抗体所有全部由人类抗体基因所编码。人源化抗体可以**减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。人源化抗体包括嵌合抗体、改型抗体和全人源化抗体等几类。
例如:人-鼠嵌合抗体。此抗体为通过基因工程技术,将人IgGC区与鼠IgGV区连接,导入细胞内表达制备而成的抗体。 吉林犬抗体哪里有
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