下面总结了几种具有不同特异性的二抗:针对整个抗体分子(H+L)具有特异性:如抗IgG(H+L),此类抗体既可以与抗体的重链结合也可以与轻链结合,即与抗体分子的Fc,F(ab’)2/Fab部分均可反应,抗IgG(H+L)也可以与其他免疫球蛋白家族反应(如lgM和IgA),因为所有的免疫球蛋白都具有相同的轻链(kappa链或lambda链)。针对Fab片段具有特异性:这类抗体与重链轻链均可以结合,由于它们可以与轻链反应,它们同时也已和具有相同轻链的其他种类的免疫球蛋白反应。针对Fc片段或重链具有特异性:这类抗体和重链的Fc部分反应,一次它们是类别特异性的(即gamma链特异性抗体只与IgG反应,mu链特异性抗体只识别IgM,依此类推)。轻链(kappa,labmda)特异性:与所有类别的抗体反应,因为所有类别的抗体均具有相同的lambda链或kappa链。 诊断抗体是指针对疾病标志物分子的抗体。山羊抗体型号
Nanobodydiscovery纳米抗体来源:在骆驼科的动物体内会产生一种独特的抗体——缺失轻链的重链抗体(HcAb)。通常把源于这种抗体的可变区片段称为纳米抗体(Nanobody)。纳米抗体具有高亲和力和高特异性的特点。纳米抗体结构:纳米抗体为重链抗体的可变区部分VHH(骆驼重链抗体的重链可变区,命名为VHH),分子只有12~15kDa,稳定性明显优于人抗体。纳米抗体同样含有3个CDR,其中CDR3对亲和力起到主要作用。与人抗体VH相比,纳米抗体的CDR3更长,可以形成凸环结构,能够深入抗原内部更好的结合抗原,因而亲和力更高。此外,纳米抗体的FR2的疏水残基被亲水残基取代,水溶性更好,不易形成聚集体。 四川cst抗体一抗诊断抗体也属于体外诊断试剂(IVD);
抗体规律:
(1)初次反应产生抗体:当抗原***次进入机体时,需经一定的潜伏期才能产生抗体,且抗体产生的量也不多,在体内维持的时间也较短。
(2)再次反应产生抗体:当相同抗原第二次进入机体后,开始时,由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合,可使原有抗体量略为降低。随后,抗体效价迅速大量增加,可比初次反应产生的多几倍到几十倍,在体内留存的时间亦较长。
(3)回忆反应产生抗体:由抗原刺激机体产生的抗体,经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原,可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同,则称为特异性回忆反应;若与初次反应不同,则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的,短时间内即很快下降。
样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体*识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来。样本的物种应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy和NCBIBLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。 凝集素是指与颗粒性抗原结合出现凝集的抗体。
人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造,重新表达的抗体,其大部分氨基酸序列为人源序列取代,基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,又降低了其异源性,有利应用于人体。
人源化抗体就是指抗体的恒定区部分(即CH和CL区)或抗体所有全部由人类抗体基因所编码。人源化抗体可以**减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。人源化抗体包括嵌合抗体、改型抗体和全人源化抗体等几类。
例如:人-鼠嵌合抗体。此抗体为通过基因工程技术,将人IgGC区与鼠IgGV区连接,导入细胞内表达制备而成的抗体。 二抗应选用与使用的一抗抗体相同的物种来源。河北犬抗体二抗
一抗是在什么物种来源的,相应的二抗也要是抗该物种的抗体。山羊抗体型号
抗体的纯度:亲和层析纯化的抗体一般更受人们欢迎,因为这些产品的纯度比较高,产生的非特异性背景比较少。但是有些情况下也要考虑到纯化过程中损失的IgG部分,因为其中含有亲和力很高的抗体,尤其是当目的抗原存在的量很小的时候,高亲和性的IgG部分就显得尤为重要。下面简单介绍几种二抗探针的优缺点及其适用的实验:酶:主要有两种不同的酶耦联物,HRP和AP。比较而言,前者更经济、快速、稳定,而后者较前者更为灵敏,通常情况下,HRP广泛应用于免疫组化,westermblot和ELISA中,而碱性磷酸酶(AP)更适合于固相的免疫检测实验,如ELISA和westernblot。 山羊抗体型号
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