样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体*识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来。样本的物种应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy和NCBIBLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。 按与抗原结合后是否出现可见反应,可分为:在介质参与下出现可见结合反应的完全抗体,即通常所说的抗体。山东Santa cruz抗体二抗
抗体基因重排:抗体的L链是由C、V、J三个基因簇编码的,H链由C、V、D、J四个基因簇编码的。V是编码可变区,有300个种类;D编码高变区,有15 ~ 20个种类;J编码连接V、C的结合区,有4~5个种类;C编码恒定区,*有一种。这些外显子通过多种多样的重排,所合成出的肽链,还要再进一步进行L和H链组合,这样***生成的抗体种类就非常多了。抗体基因重排是发生在淋巴细胞分化的时候。抗体的主要功能从而有效地***侵入机体内的微生物、寄生虫等异物,中和它们所释放的***或***某些自身抗原,使机体保持正常平衡,但有时也会对机体造成病理性损害,如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生,对人体可造成危害。 云南犬抗体二抗诊断抗体是指针对疾病标志物分子的抗体。
凡能产生抗体的高等动物(包括人类),当注入胸腺依赖性抗原(TD抗原)进行免疫时都有着相同产生抗体的规律,即存在初次免疫应答(primaryimmuneresponse)和再次免疫应答(secondaryimmuneresponse)。
初次免疫应答是指机体***次接触某种抗原物质引起特异性抗体产生的过程。其特点是潜伏期长(一周以上),产生的抗体滴度(效价)低、维持的时间短,产生的抗体以IgM为主。
再次免疫应答是指机体以后再次接触同样的抗原后所产生的抗体应答过程。其特点是产生抗体的潜伏期短、抗体滴度高,维持的时问长,产生的抗体以IgG为主。
人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造,重新表达的抗体,其大部分氨基酸序列为人源序列取代,基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,又降低了其异源性,有利应用于人体。
人源化抗体就是指抗体的恒定区部分(即CH和CL区)或抗体所有全部由人类抗体基因所编码。人源化抗体可以**减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。人源化抗体包括嵌合抗体、改型抗体和全人源化抗体等几类。
例如:人-鼠嵌合抗体。此抗体为通过基因工程技术,将人IgGC区与鼠IgGV区连接,导入细胞内表达制备而成的抗体。 构成抗体的结构组分:重链、轻链、F(ab)/Fc 区和同型。
下面总结了几种具有不同特异性的二抗:针对整个抗体分子(H+L)具有特异性:如抗IgG(H+L),此类抗体既可以与抗体的重链结合也可以与轻链结合,即与抗体分子的Fc,F(ab’)2/Fab部分均可反应,抗IgG(H+L)也可以与其他免疫球蛋白家族反应(如lgM和IgA),因为所有的免疫球蛋白都具有相同的轻链(kappa链或lambda链)。针对Fab片段具有特异性:这类抗体与重链轻链均可以结合,由于它们可以与轻链反应,它们同时也已和具有相同轻链的其他种类的免疫球蛋白反应。针对Fc片段或重链具有特异性:这类抗体和重链的Fc部分反应,一次它们是类别特异性的(即gamma链特异性抗体只与IgG反应,mu链特异性抗体只识别IgM,依此类推)。轻链(kappa,labmda)特异性:与所有类别的抗体反应,因为所有类别的抗体均具有相同的lambda链或kappa链。 按抗体的来源,可将其分为天然抗体和免疫抗体。湖南兔子抗体供货商
抗体的主要功能是与抗原(包括外来的和自身的)相结合,从而有效地消除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物。山东Santa cruz抗体二抗
抗原的呈递:抗原呈递细胞(antigenpresentingcell,APC)的抗原呈递作用是一个涉及抗原摄取、处理与呈递的复杂过程。比较主要的抗原呈递分子是主要组织相容性复合物(majorhistocompatibilitycomplex,MHC)。MHC分为两个大类:MHC-I和MHC-II,它们呈递的抗原蛋白来源不同,降解抗原的方式不同,结合肽段长度也不同,可以分别将抗原呈递给细胞毒性T细胞(CD8Tcell)和辅助型T细胞(CD4Tcell)。抗原呈递细胞(Antigen-presentingcells,APC)是指能够摄取、加工处理抗原,并将处理过的抗原呈递给T细胞的一类免疫细胞。APC主要包括单核-吞噬细胞、树突状细胞、B细胞、朗格汉斯细胞以及**细胞的病毒***的靶细胞等(其中树突状细胞的抗原呈递能力比较强)。 山东Santa cruz抗体二抗
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