体外诊断均相发光免疫分析

在重症炎症（如脓毒症）、CAR-T诊疗或某些自身免疫病中，细胞因子风暴是危及生命的状态，需要快速监测多种炎症因子。基于微球阵列的均相化学发光多重检测技术，能够从单份微量血清或血浆样本中，同时定量检测IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十几种关键细胞因子的浓度。这种高通量、多参数的分析能力，使得临床医生或研究人员能够多方面、快速地掌握患者的炎症风暴谱系，评估严重程度，并监测诊疗干预（如抗细胞因子抗体）的效果，为精细免疫调控提供依据。均相化学发光与荧光免疫技术相比，优势在哪？体外诊断均相发光免疫分析

GPCR是比较大的药物靶点家族，其功能研究涉及配体结合、第二信使产生、下游信号通路活化等多个层面。均相发光技术多方面渗透于此领域。对于配体结合竞争实验，可采用TR-FRET，将受体标记供体，配体标记受体。对于GPCR活化后比较关键的cAMP积累或IP3/DAG产生，均有成熟的均相检测试剂盒。例如，cAMP检测常采用基于抗体竞争原理的均相发光免疫分析。细胞裂解后，内源性cAMP与加入的标记cAMP竞争结合有限量的抗cAMP抗体。抗体结合事件通过FRET或Alpha技术被检测，信号强度与内源性cAMP浓度成反比。这类方法直接在细胞裂解液中进行，快速、灵敏，完美契合GPCR激动剂/拮抗剂的高通量筛选。山西技术升级均相发光应用领域浦光生物均相化学发光新技术！

热迁移分析（CETSA）用于研究药物在细胞或组织水平与靶蛋白的结合，传统方法依赖Western Blot，通量低。与均相化学发光免疫检测（特别是Alpha技术）结合形成的CETSA HT，实现了高通量化。细胞经药物处理和不同温度加热后裂解，针对目标蛋白的特异性抗体对（分别偶联Alpha供体珠和受体珠）被加入裂解液。只有未因热变性而沉淀的、保持天然构象的蛋白才能被两个抗体同时识别并拉近微珠产生信号。通过绘制药物处理组与对照组的热稳定性曲线，可以直观看到药物结合引起的蛋白热稳定性偏移（Tm变化），从而确认靶点结合并评估结合强度，广泛应用于早期药物发现中的靶点确证。

均相发光技术比较明显的优势是其操作的极度简便性所带来的高通量检测能力。由于摒弃了所有分离步骤，典型的均相发光检测只需将样本、识别元件（如抗体）和发光试剂依次加入微孔板中，混合孵育后即可直接读数。这种“加样-孵育-检测”的模式，将复杂的多步流程简化为一步或两步，不仅大幅缩短了检测时间（通常可在几分钟到一小时内完成），还大限度地减少了人为操作误差和交叉污染的风险。这一特性使其完美适配现代自动化液体处理系统和多通道检测仪，能够轻松实现每天处理数万甚至数十万个样本的超高通量筛选，在药物发现、功能基因组学等需要海量数据积累的领域具有不可替代的价值。POCT市场新机遇，浦光干式均相化学发光助您把握未来！

生物发光共振能量转移（BRET）是一种天然的或工程化的均相检测技术。它利用生物发光蛋白（如海肾荧光素酶Rluc）作为供体，催化底物（如腔肠素）产生化学发光，该能量直接转移给邻近的荧光蛋白（如GFP、YFP）受体，使其发出荧光。BRET无需外部光源激发，完全消除了光散射和自发荧光的背景，信噪比极高。在活细胞研究中，可将Rluc和荧光蛋白分别与两个可能相互作用的靶蛋白融合，通过监测BRET信号来实时、动态地研究蛋白互作的空间接近性和动力学，是研究GPCR二聚化、信号转导复合物组装的强大工具。均相化学发光在自身免疫性疾病诊断中的作用大吗？化学发光均相发光优点

均相化学发光的信号放大机制是怎样的？体外诊断均相发光免疫分析

均相化学发光技术的实现，主要依赖于两种设计哲学。第一种是直接能量转移路径，表示技术为AlphaLISA/AlphaScreen。其关键是使用能产生单线态氧的供体微珠和含有化学发光剂的受体微珠。只有当生物识别事件将两者拉近至200纳米以内时，供体产生的单线态氧才能有效触发受体珠内的化学发光反应。未结合的微珠因距离过远，单线态氧在扩散途中淬灭，不产生信号。第二种是活性调控路径，即生物识别事件直接调控化学发光反应的效率或速率。例如，将化学发光反应的催化剂（如酶）或其抑制剂/共反应物与生物分子偶联，当目标分子存在导致它们接近或分离时，化学发光信号被开启或关闭。这两种路径均巧妙地利用“临近”或“调控”将特异性识别与信号产生直接耦合。体外诊断均相发光免疫分析