随着技术的进步，病理切片染色也不断更新。近年来出现的 **多重免疫荧光（mIF）** 和 **多重免疫组化（mIHC）** 技术，使得在同一张切片上检测多个蛋白成为可能。这些方法结合数字病理和图像分析软件，可以对肿瘤免疫微环境进行***解析。此外，**空间转录组学** 和 **成像质谱** 技术的引入，使得病理切片不仅能显示组织形态，还能提供分子层面的空间信息。这些新方法正在推动病理学从传统形态学向多组学整合的方向发展。专业病理染色切片检测拍照平台。阿尔辛蓝染色用于检测酸性黏多糖。南京Von Kossa染色
病理染色的主要步骤•取材：从***或尸体上获取所需的组织样本。•固定：使用福尔马林或其他固定剂固定组织，以保持其原有的结构。•脱水：用酒精或其他脱水剂去除组织中的水分。•透明化：用二甲苯或其他透明剂处理组织，使其透明。•包埋：将透明化的组织放入石蜡中，制成硬块。•切片：用切片机将石蜡块切成薄片（通常为4-5微米厚）。•贴片：将切片贴在载玻片上，并进行烘烤使其牢固。•脱蜡：用二甲苯去除切片上的石蜡。•复水：用酒精梯度逐步将切片重新水化。•染色：根据需要选择合适的染色方法进行染色。•封片：用封片剂覆盖切片，防止染色脱落，并便于长期保存和观察。抗酒石酸酸性磷酸酶染色结果分析苏木精-伊红（H&E）染色是常用的组织学染色方法。
随着分子生物学的发展，**免疫组织化学（IHC）染色** 在病理切片分析中占据了**地位。IHC 利用特异性的抗原-抗体结合原理，将目标分子在组织中的定位可视化。常用的方法是使用与目标蛋白结合的一抗，再通过带有酶（如 HRP）的二抗显色。DAB 显色产物在显微镜下呈棕黄色，常与苏木精复染以增强对比度。IHC 可检测**标志物（如 p53、Ki-67、HER2）、炎症因子（如 TNF-α、IL-6）、细胞分化标志物等，既有助于临床诊断，也能为科研提供定量或半定量分析。
在脑卒中模型中用到的染色方法：•在脑卒中（如中风）的研究中，TTC染色同样用于区分正常的脑组织和缺血性损伤区域。正常的脑组织会被染成红色，而缺血区域则保持无色。•通过这种方法，研究人员可以直观地观察到脑组织中的缺血**和半影区，并进行定量分析。染色步骤1. 准备样品：•将动物安乐死后，迅速取出心脏或脑组织，并切成一定厚度的切片（通常为2mm厚）。2. 染色：•将切片放入预先配制好的TTC溶液中（通常是1%~2%的TTC溶解在生理盐水中）。•将切片置于37°C恒温水浴中孵育一段时间（通常为15-30分钟）。3. 固定：•染色完成后，将切片转移到4%多聚甲醛或其他固定液中进行固定，以防止组织自溶和保存染色结果。4. 拍照和分析：•固定后的切片可以用相机拍照记录，然后使用图像分析软件测量梗死区域和总组织面积，计算梗死面积占总组织面积的百分比。优点•操作简便：染色切片帮助诊断各种疾病的机制。
随着科技进步，病理染色正与数字化病理学（Digital Pathology）进行深度融合，开启了病理诊断的新时代。数字化病理的**是全玻片扫描（Whole Slide Imaging, WSI）技术，它将传统的染色玻片通过高分辨率扫描仪转化为数字图像文件。这不仅极大地方便了远程会诊、教学和图像归档，更重要的是，它为人工智能（AI）和图像分析软件的应用奠定了基础。通过对标准化染色的数字图像进行计算分析，AI系统可以辅助病理医生进行量化分析，例如自动计算Ki-67增殖指数、腺体密度或特定染色阳性细胞的比例，从而消除主观误差，提高诊断的一致性和效率。同时，数字化技术还能通过图像处理优化染色对比度，甚至模拟不同染色的效果，辅助医生更深入地解读传统病理染色切片，实现了诊断流程的现代化和智能化，极大地扩展了病理染色的应用潜力。醛复红染色用于显示弹性纤维。固蓝染色实验
Periodic Acid-Schiff (PAS)染色用于检测糖类物质。南京Von Kossa染色
另一类常用的染色方法是 **免疫荧光（IF）染色**，与 IHC 类似，都是基于抗原-抗体反应，但其标记物为荧光染料。常见的荧光染料包括 FITC（绿色）、TRITC（红色）、Cy3、Alexa Fluor 系列等。免疫荧光染色的优势在于可以进行 **多重标记**，同时检测组织切片中的多个分子，并通过共聚焦显微镜实现三维成像。这种方法在神经科学、干细胞研究和**微环境研究中应用尤为***，例如可以同时观察神经元标志物 NeuN、星形胶质细胞标志物 GFAP 以及小胶质细胞标志物 Iba1。南京Von Kossa染色
